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5mM phosphate buffer(0.4 sucrose pH7.5)를 제조하는 방법을 잘 모르겠습니다 잘모르겠어서 글을 올립니다. 이전에 다른 글에 나와있긴 했는데, 저의 학업적 능력이 부족하여 이해를 못하겠습니다. Na2HPO4 와 NaH2PO4를 이용하는 것으로 알고 있는데.. pH를 NaOH로 어떻게 맞추어야 하는지 잘 모르겠어서 올려봅니다...
- 화학
- phosphate buffer
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변
이동광님의 답변
2024-05-23- 2
먼저 0.1 M 즉 100mM PB(phosphate buffer 줄임말) 를 만듭니다. monobasic 3.394g/liter , dibasic 20.214g/liter 입니다.
이것을 만들어서 stock 으로 사용하시고 지금 요거는 ph7.4 정도 될겁니다.
그리고 sucrose 는 30~50 % (아마 50% 가 maxium ) 을 만들어 stock 으로 사용합니다.
이 두 stock 을 가지고 5mM PH+ sucrose 만들고 1N NaOH 로 ph를 맞추면 될겁니다. ph 를 맞춘 후에 최종 volume 을 맞추면 됩니다.
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답변
조윤환님의 답변
2024-05-27- 0
buffer solution, 우리말로는 완충용액 이라고 합니다.
산이나 염기를 어느 정도 가해도 pH가 급격하게 변하지 않는 용액을 지칭 합니다.
보통은 강산과 약염기의 용액 또는 강염기와 약산의 용액이 완충용액 입니다.
Na2HPO4 와 NaH2PO4는 강염기인 NaOH와 약산인 H3PO4의 반응 결과물이므로 이것을 물에 녹이면 같은 결과가 나옵니다.
이들을 용액으로 만든 다음 원하는 pH로 조정해서 사용하게 됩니다. 지금 만드려고 하는 pH는 7.5 입니다. 구성 성분을 다 넣고 얻어지는 pH가 목표한 pH보다 낮으면 강염기인 NaOH를 써서 조절하면 되고, 높으면 H3PO4를 써서 조절하는 방식입니다.
목표하는 최종부피에 7~80% 수준, 즉 1L를 만들 계획이라면 우선 7~800mL정도부피로 만든 다음에 pH미터로 pH를 확인하면서 NaOH나 H3PO4를 조금씩 넣으면서 목표하는 pH로 맞추세요. 그런 다음에 추가로 물을 넣어 1L가 되도록 하면 되는 겁니다.