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HPLC 기기로 분석중 문제가 발생하여 질문드립니다.
1. 혹시 abort 기능을 자주 사용했을때 기기에 문제가 발생하게 되나요?
2. Retention time을 조정하고자 이동상 용매의 극성을 조정했는데 retention time이 정상적으로 변하지 않네요. (Impurity가 발생해서 wash하고 다시 측정하면 계속 동일한 자리에서 peak이 발생) 혹시 원인이 어떻게 될까요?
감사합니다.
- HPLC
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변
남윤식님의 답변
2024-05-24- 0
안녕하세요. abort 기능은 자주 사용하지 않는 것이 좋습니다. 장비 기능상에는 문제가 발생하지 않을 것이나, 컬럼속에 들어 있는 시료가 용매 상태에 녹여줘 축척이 될 수 있으며, 이는 실험에서 지속적으로 시료의 RT를 변화게 만들것 입니다. 따라서 시료 측정이 시작하면, 컬럼속에 있는 시료가 완전히 나올수 있게 충분한 시간을 주거나, 용매의 조건을 변경시켜 빨리 용출 되도록 하여야 할것입니다. 두번째 경우는 RT가 변하지 않는 경우는 1. 실제로 용매의 조성이 변화지 않았을 경우로 용매의 양이 부족하거나, 아니면 PTEF line에 공기가 들어 있을 경우 입니다. 이를 완전히 제거해야 합니다. 2 pump의 오작동이 아닐까요. 용매 조성을 변경하면 RT가 변경되어야 하지만 이것이 잘되지 않는다면 pump의 오작동이 것입니다. 3 이경우는 column에 시료가 너무 많이 충진되어 있는 경우 입니다. column에 위의 경우처럼 자주 abort 를 실행할 경우 column에서의 분리능이 떨어질수 있습니다.
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