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지식나눔

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NK cell (급)

2004-05-11 org.kosen.entty.User@70209376 강영미(kkangie)
  • 2
제가 NK cells line을 분양받아서 reconstruction 했는데.. cell이 다 죽어 버렸습니다. 처음엔 ATCC에 있는 조성대로 알파 MEM으로 complete media를 만들어서 했었고 두번째에 MyoleCult Medium으로 했습니다. 그런데 두가지 방법 모두다 cell이 죽어버렸습니다. 무엇이 문제인지 몰라서 이렇게 글을 올립니다. suspention cell과 adhesion cell과 reconstruction방법이나 subculture방법이 크게 다르지 않다고 들었는데 특이하게 다른점이 있는지도 궁금합니다. NK cell을 분양 받았으면 합니다. ATCC에서 주문을 하니, 시간이 너무 길어지더라구요 제가 쓰던 세포는 NK-92MI입니다.
  • natural killer cell
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답변 2
  • 답변

    유종석님의 답변

    2004-05-19
    • 0
    제한된 정보로 왜 세포배양에 실패하셨는지 알수 없으나, 한가지 알려드리고 싶은 것은 세포 밀도에 대해 생각해 보신지 모르겠네요. 다음은 유럽에 있는 저의 협동 연구자로부터 알게된 정보입니다. 주의해서 생각해 보실 부분은 "subcluture"와 "harvest" 부분입니다. 단, 이 정보는 NK-92에 대한 정보임을 밝힘니다. 도움이 되셨으면 합니다. Cell Culture Data Morphology cells growing in clumps in suspension Medium 75% alpha-MEM + 12.5% FBS + 12.5 % horse serum + 2 mM L-glutamine + 10 ng/ml IL-2 Subculture split saturated culture 1:2 every 2 days; seed out at ca. 0.5 x 106 cells/ml; maintain at 0.2-0.6 x 106 cells/ml; after thawing, it is recommended to first culture the cells in 24-well-plates Incubation at 37 °C with 5% CO2 Doubling time doubling time of ca. 40-50 hours Harvest maximum density of about 0.8 x 106 cells/ml Storage frozen with 70% medium, 20% FBS, 10% DMSO at about 4 x 106 cells/ampoule > > 제가 NK cells line을 분양받아서 reconstruction 했는데.. > cell이 다 죽어 버렸습니다. > 처음엔 ATCC에 있는 조성대로 알파 MEM으로 complete media를 만들어서 했었고 두번째에 MyoleCult Medium으로 했습니다. >그런데 두가지 방법 모두다 cell이 죽어버렸습니다. >무엇이 문제인지 몰라서 이렇게 글을 올립니다. > >suspention cell과 adhesion cell과 reconstruction방법이나 subculture방법이 크게 다르지 않다고 들었는데 특이하게 다른점이 있는지도 궁금합니다. > >NK cell을 분 받았으면 합니다. >ATCC에서 주문을 하니, 시간이 너무 길어지더라구요 >제가 쓰던 세포는 NK-92MI입니다. > >
    답변수정
    제한된 정보로 왜 세포배양에 실패하셨는지 알수 없으나, 한가지 알려드리고 싶은 것은 세포 밀도에 대해 생각해 보신지 모르겠네요. 다음은 유럽에 있는 저의 협동 연구자로부터 알게된 정보입니다. 주의해서 생각해 보실 부분은 "subcluture"와 "harvest" 부분입니다. 단, 이 정보는 NK-92에 대한 정보임을 밝힘니다. 도움이 되셨으면 합니다. Cell Culture Data Morphology cells growing in clumps in suspension Medium 75% alpha-MEM + 12.5% FBS + 12.5 % horse serum + 2 mM L-glutamine + 10 ng/ml IL-2 Subculture split saturated culture 1:2 every 2 days; seed out at ca. 0.5 x 106 cells/ml; maintain at 0.2-0.6 x 106 cells/ml; after thawing, it is recommended to first culture the cells in 24-well-plates Incubation at 37 °C with 5% CO2 Doubling time doubling time of ca. 40-50 hours Harvest maximum density of about 0.8 x 106 cells/ml Storage frozen with 70% medium, 20% FBS, 10% DMSO at about 4 x 106 cells/ampoule > > 제가 NK cells line을 분양받아서 reconstruction 했는데.. > cell이 다 죽어 버렸습니다. > 처음엔 ATCC에 있는 조성대로 알파 MEM으로 complete media를 만들어서 했었고 두번째에 MyoleCult Medium으로 했습니다. >그런데 두가지 방법 모두다 cell이 죽어버렸습니다. >무엇이 문제인지 몰라서 이렇게 글을 올립니다. > >suspention cell과 adhesion cell과 reconstruction방법이나 subculture방법이 크게 다르지 않다고 들었는데 특이하게 다른점이 있는지도 궁금합니다. > >NK cell을 분 받았으면 합니다. >ATCC에서 주문을 하니, 시간이 너무 길어지더라구요 >제가 쓰던 세포는 NK-92MI입니다. > >
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  • 답변

    김남철님의 답변

    2004-05-20
    • 0
    ATCC에서 받으신 건가요? 말씀하신 세포는 아니지만 저희도 배달 중의 문제인지 새로 받아서 풀어보면 자라지 않더군요.. 그때마다 배송 문제라고 새로 받아서 다시하곤 했었습니다. 국내 세포주 은행은 찾아보셨는지요..(없군요... -_-;) > > 제가 NK cells line을 분양받아서 reconstruction 했는데.. > cell이 다 죽어 버렸습니다. > 처음엔 ATCC에 있는 조성대로 알파 MEM으로 complete media를 만들어서 했었고 두번째에 MyoleCult Medium으로 했습니다. >그런데 두가지 방법 모두다 cell이 죽어버렸습니다. >무엇이 문제인지 몰라서 이렇게 글을 올립니다. > >suspention cell과 adhesion cell과 reconstruction방법이나 subculture방법이 크게 다르지 않다고 들었는데 특이하게 다른점이 있는지도 궁금합니다. > >NK cell을 분양 받았으면 합니다. >ATCC에서 주문을 하니, 시간이 너무 길어지더라구요 >제가 쓰던 세포는 NK-92MI입니다. > >
    답변수정
    ATCC에서 받으신 건가요? 말씀하신 세포는 아니지만 저희도 배달 중의 문제인지 새로 받아서 풀어보면 자라지 않더군요.. 그때마다 배송 문제라고 새로 받아서 다시하곤 했었습니다. 국내 세포주 은행은 찾아보셨는지요..(없군요... -_-;) > > 제가 NK cells line을 분양받아서 reconstruction 했는데.. > cell이 다 죽어 버렸습니다. > 처음엔 ATCC에 있는 조성대로 알파 MEM으로 complete media를 만들어서 했었고 두번째에 MyoleCult Medium으로 했습니다. >그런데 두가지 방법 모두다 cell이 죽어버렸습니다. >무엇이 문제인지 몰라서 이렇게 글을 올립니다. > >suspention cell과 adhesion cell과 reconstruction방법이나 subculture방법이 크게 다르지 않다고 들었는데 특이하게 다른점이 있는지도 궁금합니다. > >NK cell을 분양 받았으면 합니다. >ATCC에서 주문을 하니, 시간이 너무 길어지더라구요 >제가 쓰던 세포는 NK-92MI입니다. > >
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