2004-11-20
org.kosen.entty.User@a409c8b
이성일(major1)
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Flow cytometric analysis중에 FACScalibur flow cytometry방법을 알고
싶습니다..자세하게 답변 부탁드립니다..
- count
- log fluoresence
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 4
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답변
신정규님의 답변
2004-11-20- 0
>Flow cytometric analysis중에 FACScalibur flow cytometry방법을 알고 > >싶습니다..자세하게 답변 부탁드립니다.. > > FACS란 유액상태의 입자나 세포가 일정 감지 지역을 통과할 때 각각의 입자나 세포를 신속하게 측정하여, 한 세포가 갖는 여러 특징을 동시에 측정하고 특정한 부분을 선택하여 분석하고 분리할 수 있는 장비입니다. 형광염색소(Fluorescent dye)와 단클론 항체(Monoclonal antibodies)를 사용하여 세포의 표면 및 내부가 갖는 면역상태를 파악하고 세포 혹은 핵 내부의 DNA 양 분석을 통해 종양의 성격을 파악할 수 있는 있는 장비입니다. 이 기기는 immumophenotyping, cell cycle, ploid, proliferation assay, cell signal, apoptosis assay, intracellular ionized calcium detection, chromosome analysis, membarne potential assay, RNA measurement, nuclear associated antigen quantitation 등 여러가지 목적에 사용될수 있습니다. 또한 FACSCalibur의 경우에는 analysis용으로 이용되고 있고 FACSVantage의 경우에는 analysis 및 sorting에도 사용될수 있습니다. FACSCalibur와 FACSVantage 모두 488nm Laser를 가지고 있고 FACSCalibur의 경우는 추가로 Red Diode(635nm)를 가지고 있어서 4-color를 동시에 detection 할 수 있습니다. 이 기계를 사용한 논문을 하나 첨부해 드립니다. -
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김성원님의 답변
2004-11-20- 0
아래 글에 해당되는 홈페이지입니다. 인용을 하신 경우 해당 URL을 올려주시는 것이 질문자에게도 도움이 될 것 같습니다. >FACS란 유액상태의 입자나 세포가 일정 감지 지역을 통과할 때 각각의 입자나 세포를 신속하게 측정하여, 한 세포가 갖는 여러 특징을 동시에 측정하고 특정한 부분을 선택하여 분석하고 분리할 수 있는 장비입니다. 형광염색소(Fluorescent dye)와 단클론 항체(Monoclonal antibodies)를 사용하여 세포의 표면 및 내부가 갖는 면역상태를 파악하고 세포 혹은 핵 내부의 DNA 양 분석을 통해 종양의 성격을 파악할 수 있는 있는 장비입니다. > >이 기기는 immumophenotyping, cell cycle, ploid, proliferation assay, cell signal, apoptosis assay, intracellular ionized calcium detection, chromosome analysis, membarne potential assay, RNA measurement, nuclear associated antigen quantitation 등 여러가지 목적에 사용될수 있습니다. 또한 FACSCalibur의 경우에는 analysis용으로 이용되고 있고 FACSVantage의 경우에는 analysis 및 sorting에도 사용될수 있습니다. > >FACSCalibur와 FACSVantage 모두 488nm Laser를 가지고 있고 FACSCalibur의 경우는 추가로 Red Diode(635nm)를 가지고 있어서 4-color를 동시에 detection 할 수 있습니다. > >이 기계를 사용한 논문을 하나 첨부해 드립니다. > -
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전주홍님의 답변
2004-11-21- 0
FACS (Fluorescence Activated Cell Sorter)는 Flow cytometry 의 한 기법으로 cell-based assay로 볼 수 있습니다. 이름에서 나와 있듯이 여러가지 실험기법(Fluorescence dye-conjugated ligand or antibody, fluorescence dyes for DNA, fluorescence enzyme substrate, 등등...)을 이용하여 형광물질로 세포를 labeling을 한 후 가는 관을 통해 흘리면서 형광의 intensity를 기준으로 세포를 분류하여 세포를 counting하는 방법으로 간단히 설명할 수 있습니다(FACS, flow cytometry이라고 명명한 이유가 대충 설명이 되죠...) 그러므로 예를 들면, x-축은 fluorescence intensity로 y-축은 cell number로 놓으면 특정 fluorescence intensity를 가진 세포의 수를 counting할 수 있겠죠. 실험을 할 때에는 control group에 비해 어떻게 변하느냐를 비교하는 것이 일반적이기 때문에 control에서 나타나는 background fluorescence 보다 높게 나타나는 부분에서 세포가 얼만큼 많이 위치하느냐를 판단해야 겠죠(때론 얼만큼 줄어드느냐...)... 또한, 직접적으로 세포를 sorting 할 수 있는 기능이 있으면 특정 fluorescence intensity를 띠는 cell population을 분리하여 해당 세포만 isolation할 수도 있습니다. 그리고 fluorescence가 아니더라도 세포의 크기별로도 분류가 가능하기도 하죠...(예전에 제가 세포의 크기에 따라 세포를 sorting하여 cell culture를 한적이 있어서요...) -
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김중경님의 답변
2004-11-21- 0
>Flow cytometric analysis중에 FACScalibur flow cytometry방법을 알고 > >싶습니다..자세하게 답변 부탁드립니다.. > > 몇 년간 회사에서 flow cytometer를 개발한 경험이 있습니다. 일반적인 Flow cytometer에 관한 소개 자료와 BD사에서 제공하는 FACSCalibur 안내 자료를 첨부합니다. 도움이 되길 바랍니다. 자료 보시고 더 궁금한 점이 있으실 경우, 질문 올려주시면 아는 범위 내에서 답글 올리겠습니다.