2005-01-14
org.kosen.entty.User@21e8f59b
김상우(doctor1)
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rat의 pancreas를 분리해서 cytokine들의 level을 알아볼려고 합니다.
어떠한 방법들이 있는지.... 적출 후 샘플 전처리 부터 측정 방법에 이르기까지 알고 계신분은 조언 부탁드립니다.
많은 결과 있으시길..
- cytokine
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답변 4
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답변
양영님의 답변
2005-01-14- 0
>rat의 pancreas를 분리해서 cytokine들의 level을 알아볼려고 합니다. >어떠한 방법들이 있는지.... 적출 후 샘플 전처리 부터 측정 방법에 이르기까지 알고 계신분은 조언 부탁드립니다. >많은 결과 있으시길. 일단 ELISA로 측정을 하면 active, inactive cytokine을 모두 측정할수가있죠. 판매회사는 R&D를 저는 선호하는데 다른회사는 web에 많이나와요. 그리고 RT-PCR 방법을 사용하기도하죠. primer는 직접제작하거나 논문을 참조하지요. Northern이나 Western은 민감도 때문에 잘 안쓰는 방법이고요. pancrease를 tissue homogenizer로 갈아서 원심분리후에 상층액을 사용하면 되구요.. 또는 무슨 처리를 원하면 배지에 처리후에 하루정도 배양후에 배지를 가지고 측정해도 되구요 -
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김윤규님의 답변
2005-01-15- 0
>rat의 pancreas를 분리해서 cytokine들의 level을 알아볼려고 합니다. >어떠한 방법들이 있는지.... 적출 후 샘플 전처리 부터 측정 방법에 이르기까지 알고 계신분은 조언 부탁드립니다. >많은 결과 있으시길.. 최근에는 Single Cell 수준에서 분비되는 Cytokine을 측정하는 ELISPOT 기법으로 극미량의 양도 측정 가능 합니다. 자료필요하면 연락 주십시요 -
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김상우님의 답변
2005-01-15- 0
>>rat의 pancreas를 분리해서 cytokine들의 level을 알아볼려고 합니다. >>어떠한 방법들이 있는지.... 적출 후 샘플 전처리 부터 측정 방법에 이르기까지 알고 계신분은 조언 부탁드립니다. >>많은 결과 있으시길. > >일단 ELISA로 측정을 하면 active, inactive cytokine을 모두 측정할수가있죠. 판매회사는 R&D를 저는 선호하는데 다른회사는 web에 많이나와요. > >그리고 RT-PCR 방법을 사용하기도하죠. primer는 직접제작하거나 논문을 참조하지요. > >Northern이나 Western은 민감도 때문에 잘 안쓰는 방법이고요. > >pancrease를 tissue homogenizer로 갈아서 원심분리후에 상층액을 사용하면 되구요.. 또는 무슨 처리를 원하면 배지에 처리후에 하루정도 배양후에 배지를 가지고 측정해도 되구요 -
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송지영님의 답변
2005-01-17- 0
>rat의 pancreas를 분리해서 cytokine들의 level을 알아볼려고 합니다. >어떠한 방법들이 있는지.... 적출 후 샘플 전처리 부터 측정 방법에 이르기까지 알고 계신분은 조언 부탁드립니다. >많은 결과 있으시길.. 아시다시피 혈청중이나 조직에서 특별한 자극없이 분비되는 cytokine을 ELISA로 detection하긴 매우 어렵습니다. 따라서 RT-PCR을 많이 쓰구요, 그런데도 artifact가 많아서 요즘은 semi-quantitative도 잘 안 믿고 real-time PCR결과라야 어느 정도 신뢰를 받습니다. ELISPOT은 하나의 세포가 자극을 받고 그 활성화된 세포가 어떤 Cytokine을 내느냐 하는 정밀한 결과를 주는 반면 ELISPOT reader가 있어야 하므로 많이 상용화되지는 않습니다.