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지식나눔

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Bacillus species의 spore를 정제와 germinents에 대하여 알려주세요.

2005-02-24 org.kosen.entty.User@5d2a5d19 황권택(hwangskt)
  • 1
Bacillus species의 spore를 생성시킨 다음 여기에서 vegetable cell wall들을 어떻게 깨끗하게 정제할수가 있는지요, 그리고 확인법에는 어떤것이 있는지도 알려주세요. 또한가지는 이 정제된 spore로 부터 germenation을 시키는데 germing에 가장크게 영향을 미치는 인자들이 뭐가 있을까요. 답변이나 자료를 부탁드립니다. 감사합니다.
  • spore
  • germinent
  • purification
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답변 1
  • 답변

    신정규님의 답변

    2005-03-02
    • 0
    제가 예전에 실험했던 방법입니다. Preparation of spore suspensions A stock culture of B. subtilis was transferred into nutrient broth. After incubated in nutrient broth at 37C for 24 hr, the culture was spread onto sporulation medium plates and incubated for 13-15 days at 37C. The sporulation medium consisted of nutrient agar, which is supplemented with 500 ppm of Bacto dextrose and 3 pm manganese sulfate. Sporulation was monitored bt phase-contrast microscopy. After 95~99% sporulation was attained, the plates were held at 4C for 24hr. Growth was harvested by flooding each plate with 10 mL of cold sterile distilled water and scraping the surface with a bent glass rod. Suspension was sonicated in an ice bath for three 2-min periods, which were intervened with 20 min of rest. The sonicated suspension was centrifuged (8000 g for 20 min at 4C). and washed repeatedly. After sixth centrifugation, the pellet was resuspended in cold sterile 0.85% NaCl to obtain ca. 3X10^7 cfu/mL. This suspension was stored at 4C until used. 이 실험 방법은 spore를 생성시키고 영양세포를 없애고 spore만을 harvest 해서 spore를 실험에 쓴 실험 방법입니다. 그리고 spore를 germination 시키는 방법은 크게 두가지고 하나는 activation energy(열, 전기에너지등)를 제공하는 것과 다른 하나는 영양분(nutrient)를 제공하는 것입니다. >Bacillus species의 spore를 생성시킨 다음 여기에서 vegetable cell wall들을 어떻게 깨끗하게 정제할수가 있는지요, 그리고 확인법에는 어떤것이 있는지도 알려주세요. >또한가지는 이 정제된 spore로 부터 germenation을 시키는데 germing에 가장크게 영향을 미치는 인자들이 뭐가 있을까요. >답변이나 자료를 부탁드립니다. >감사합니다.
    답변수정
    제가 예전에 실험했던 방법입니다. Preparation of spore suspensions A stock culture of B. subtilis was transferred into nutrient broth. After incubated in nutrient broth at 37C for 24 hr, the culture was spread onto sporulation medium plates and incubated for 13-15 days at 37C. The sporulation medium consisted of nutrient agar, which is supplemented with 500 ppm of Bacto dextrose and 3 pm manganese sulfate. Sporulation was monitored bt phase-contrast microscopy. After 95~99% sporulation was attained, the plates were held at 4C for 24hr. Growth was harvested by flooding each plate with 10 mL of cold sterile distilled water and scraping the surface with a bent glass rod. Suspension was sonicated in an ice bath for three 2-min periods, which were intervened with 20 min of rest. The sonicated suspension was centrifuged (8000 g for 20 min at 4C). and washed repeatedly. After sixth centrifugation, the pellet was resuspended in cold sterile 0.85% NaCl to obtain ca. 3X10^7 cfu/mL. This suspension was stored at 4C until used. 이 실험 방법은 spore를 생성시키고 영양세포를 없애고 spore만을 harvest 해서 spore를 실험에 쓴 실험 방법입니다. 그리고 spore를 germination 시키는 방법은 크게 두가지고 하나는 activation energy(열, 전기에너지등)를 제공하는 것과 다른 하나는 영양분(nutrient)를 제공하는 것입니다. >Bacillus species의 spore를 생성시킨 다음 여기에서 vegetable cell wall들을 어떻게 깨끗하게 정제할수가 있는지요, 그리고 확인법에는 어떤것이 있는지도 알려주세요. >또한가지는 이 정제된 spore로 부터 germenation을 시키는데 germing에 가장크게 영향을 미치는 인자들이 뭐가 있을까요. >답변이나 자료를 부탁드립니다. >감사합니다.
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