2005-07-02
org.kosen.entty.User@8aa0b74
- 1
어떤 단백질의 특정 도메인이 cell aggregation에 영향을 주는지 알아보기위해서 cell에 이단백질과 그 도메인이 deletion유전자를 transfection시켜서 cell aggregation 정도를 측정했습니다..
이때 negative control로 neomycin cassete를 발현하게 해서 cell aggregation에대한 negative control로 사용했다는데요..
여기서 neomycin cassete를 발현하는 cell이 어떻게 negative control로 작용하는지를 모르겠습니다..
가르쳐주세요~~
- cell aggregation
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
-
답변
전주홍님의 답변
2005-07-03- 0
막상 글로 설명하려니까 생각보다 정리가 안된다는 느낌이네요...^^ Experimental system에서 negative control과 positive control을 사용하여 간단하고 간편하게 assay validation을 하고 있습니다. negative control로 assay를 했을 때 negative의 결과가 나와야하고 positive control로 실험했을 때 postive의 결과가나와야 assay system의 타당성 또는 적합성이 검증이 되고 여기에서 나온 결과를 신뢰할 수 있겠지요... (그러나 negative와 positive에 대한 reference material로 무엇을 사용할 것인지에 대한 문제는 조금 어려울 수도 있습니다.) 그러므로 Negative나 postivie control에 사용되는 material은 기존에 잘 알려진 것이어야만 하겠죠... 세포배양계에서 특정 단백질이 cell aggregation에 관여한다고 알려져 있는데 어떤 특정 도메인이 그러한 역할을 담당할 것인가를증명하고자 한 실험인 것 같은데요... transfection 실험을 수행하게되면 mammalian expression용 vector를 사용합니다. 보통 이러한 vector에는 selectable marker (neomycine casette를 포함)가 포함된 경우가 많습니다. 그러면 transfection을 한 후 특정 유전자가 지속적으로 안정하게 발현되는 세포를 항생제 내성 여부로 판단하면서 선별할 수 있습니다. 그러므로 본 실험에서는 특정 유전자가 포함되지 않은 vector 즉 neomycin casette만 발현되는 vector만 expression하는 것을 negative control로 사용했다는 말로 해석됩니다. 물론 negative control이기 때문에 vector 상태로만 세포에 집어넣었을 때 cell aggregation에 문제가 없었다는 것이 입증된 상태이겠죠... >어떤 단백질의 특정 도메인이 cell aggregation에 영향을 주는지 알아보기위해서 cell에 이단백질과 그 도메인이 deletion유전자를 transfection시켜서 cell aggregation 정도를 측정했습니다.. >이때 negative control로 neomycin cassete를 발현하게 해서 cell aggregation에대한 negative control로 사용했다는데요.. >여기서 neomycin cassete를 발현하는 cell이 어떻게 negative control로 작용하는지를 모르겠습니다.. >가르쳐주세요~~