KOSEN 한인과학기술자네트워크

닫기

더 많은 혜택을 위해
로그인 하세요.

지식나눔

지식나눔

siRNA transfection에 관한 거요..

2005-07-26 org.kosen.entty.User@4034bd20 박지원(pjw082)
  • 1
제가 이번에 siRNA를 이용해서 처음 실험을 하는데요 올리고 주문하는 거랑 transfection할 때 얼마의 농도로 siRNA가 필요한지 몰라서요.. cell line은 HeLa cell이구여 Bioneer에 주문하려고 보니까 OPC,HPLC, PAGE로 정제된게 있구여 농도도 각각이던데 어느정도의 purity와 농도가 필요할까요?
  • siRNA
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변하기
답변 1
  • 답변

    박인영님의 답변

    2005-10-25
    • 0
    >제가 이번에 siRNA를 이용해서 처음 실험을 하는데요 >올리고 주문하는 거랑 transfection할 때 얼마의 농도로 siRNA가 필요한지 >몰라서요.. >cell line은 HeLa cell이구여 >Bioneer에 주문하려고 보니까 OPC,HPLC, PAGE로 정제된게 있구여 >농도도 각각이던데 어느정도의 purity와 농도가 필요할까요? Oligo의 purity, transfection reagent에 따라 조건을 잡으셔야 됩니다. 기왕이면 annealing된 것을 PAGE elution한 것이 있으면 편하겠지요.. 또한 oligo는 media 상에서 degradation되기 때문에 oligo를 modification시켜 stable하게 만든 것을 사용하시면 농도를 1nm이하로 줄일 수 있습니다. Invitrogene의 Stealth RNAi가 그렇더군요.. Transfection시키고 나서 media를 교체하지않아도되는 transfection reagent를 사용하시는 것이 좋겠습니다. 그런 transfection reagent로 Roche의 FuGENE6를 추천합니다..media를 교체시킬 필요가 없거든요.
    답변수정
    >제가 이번에 siRNA를 이용해서 처음 실험을 하는데요 >올리고 주문하는 거랑 transfection할 때 얼마의 농도로 siRNA가 필요한지 >몰라서요.. >cell line은 HeLa cell이구여 >Bioneer에 주문하려고 보니까 OPC,HPLC, PAGE로 정제된게 있구여 >농도도 각각이던데 어느정도의 purity와 농도가 필요할까요? Oligo의 purity, transfection reagent에 따라 조건을 잡으셔야 됩니다. 기왕이면 annealing된 것을 PAGE elution한 것이 있으면 편하겠지요.. 또한 oligo는 media 상에서 degradation되기 때문에 oligo를 modification시켜 stable하게 만든 것을 사용하시면 농도를 1nm이하로 줄일 수 있습니다. Invitrogene의 Stealth RNAi가 그렇더군요.. Transfection시키고 나서 media를 교체하지않아도되는 transfection reagent를 사용하시는 것이 좋겠습니다. 그런 transfection reagent로 Roche의 FuGENE6를 추천합니다..media를 교체시킬 필요가 없거든요.
    등록된 댓글이 없습니다.
목록
목록