지식나눔

Real time PCR mastermix에 관하여...

여러 선생님들 수고가 많으십니다. Real-time PCR 에 관하여 몇거지 여쭙고자 합니다. 고수님들의 유익한 가르침 부탁드리겠습니다. 1. Real-time PCR mastermix 의 조성 - 현재 Applied Biosystems 사의 제품을 사용하고 있는데요. 마스터믹스가 넘 비쌉니다. 제가 직점 제조하여 사용하고 싶은데 혹 정확한 조성과 농도를 알수 있을까요? 2. 일반 PCR과 비교하여 real-time PCR의 버퍼 조성이 Mg 의 농도가 높고, high salt라고 들었습니다. 그 이유가 뭔지 알고 싶습니다. 간절기에 감기 조심하시고 하시는 연구 꼭 좋은 결과 있으시길 기원합니다. 감사합니다.
  • Real time PCR
  • mastermix
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
  • 답변

    DELETED님의 답변

    >여러 선생님들 수고가 많으십니다.>>Real-time PCR 에 관하여 몇거지 여쭙고자 합니다.>>고수님들의 유익한 가르침 부탁드리겠습니다.>>1. Real-time PCR mastermix 의 조성>- 현재 Applied Biosystems 사의 제품을 사용하고 있는데요.> 마스터믹스가 넘 비쌉니다. > 제가 직점 제조하여 사용하고 싶은데 혹 정확한 조성과> 농도를 알수 있을까요?>>2. 일반 PCR과 비교하여 real-time PCR의 버퍼 조성이> Mg 의 농도가 높고, high salt라고 들었습니다.> 그 이유가 뭔지 알고 싶습니다.>>간절기에 감기 조심하시고 하시는 연구 꼭 좋은 결과 있으시길 기원합니다.>>감사합니다. Re: 1. mastermix는 그냥 SYBR green I dye를 시그마에서 따로 구매하셔서 500x를 1x로 만들어 사용하시면되고, 조성은 dNTP 와 일반 taq 혹은 hot start taq 과 buffer로 채우시면 됩니다. 2. 반드시 그렇지는 않고, enzyme activity를 높이기 위해, Mg농도가 높은 경우가 있습니다.
    >여러 선생님들 수고가 많으십니다.>>Real-time PCR 에 관하여 몇거지 여쭙고자 합니다.>>고수님들의 유익한 가르침 부탁드리겠습니다.>>1. Real-time PCR mastermix 의 조성>- 현재 Applied Biosystems 사의 제품을 사용하고 있는데요.> 마스터믹스가 넘 비쌉니다. > 제가 직점 제조하여 사용하고 싶은데 혹 정확한 조성과> 농도를 알수 있을까요?>>2. 일반 PCR과 비교하여 real-time PCR의 버퍼 조성이> Mg 의 농도가 높고, high salt라고 들었습니다.> 그 이유가 뭔지 알고 싶습니다.>>간절기에 감기 조심하시고 하시는 연구 꼭 좋은 결과 있으시길 기원합니다.>>감사합니다. Re: 1. mastermix는 그냥 SYBR green I dye를 시그마에서 따로 구매하셔서 500x를 1x로 만들어 사용하시면되고, 조성은 dNTP 와 일반 taq 혹은 hot start taq 과 buffer로 채우시면 됩니다. 2. 반드시 그렇지는 않고, enzyme activity를 높이기 위해, Mg농도가 높은 경우가 있습니다.
    등록된 댓글이 없습니다.