지식나눔

cycloheximide의 half life는 얼마나 되나요?

일반적으로 protein synthesis inhibitor로 사용되는 cycloheximide(CHX) 의 half life가 어느 정도 되는지 알고 싶습니다. 저는 실험할 때, 24시간까지 CHX 처리하여 단백질 합성이 억제되는 효과를 보았는데요.. 실제 CHX half life는 4~6시간이라고 누군가 그러더군요.. 실제 실험에서 많이 사용되는 kinase inhibitors (SP600125, SB series, PD98059, LY294002)들도 chemical activity가 24시간 내라고 하는데, 실제로 그런 것인지 궁금합니다... 논문들을 search 해봐도 그런 것은 잘 나오지 않더라구요... 누군가의 말보다 정확하게 통계를 내거나 실험한 data가 어딘가 있는지 궁금합니다. 많은 답변 부탁드려요...
  • cycloheximide
  • half life
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 2
  • 답변

    신정규님의 답변

    Cycloheximide가 반감기가 있나요? Sigma catalog에서 보면 cyclohexamide의 경우 용액을 만들어 pH 3-5상태에서 냉장 보관을 하면 매우 안정적인것으로 되어 있으며, 냉동 상태로는 18개월을 간다고 하는데.. 다음은 sigma catalogue에 나와 있는 cycloheximide에 대한 설명입니다. Preparation Instructions Cycloheximide has been reported to be soluble up to 2% (w/v) in water (20 mg/ml). The powder will dissolve slowly in water and this process may be aided by mixing or sonication. Aqueous solution stability is pH dependent. Solutions are stable for several weeks in the pH range of 3 to 5, which is the range optimal for stability. For longer term solution storage, refrigeration is suggested. Solutions refrigerated over 18 months, retained 75% of the original activity.13 Solutions prepared in distilled water may be sterile filtered or autoclaved without serious loss of activity.13 Autoclaving of medium containing cycloheximide is not recommended. The sterile cycloheximide solution should be added to sterile broth or cooled, sterile, melted agar.13 Boiling for one hour at pH 7 destroys activity, but no loss of activity is observed after 15 minutes. Under acidic conditions (pH 2), activity is not destroyed after one hour of boiling.14 Under dilute alkali conditions, decomposition occurs rapidly in solution at room temperature with the formation of 2,4-dimethylcyclohexanone.14 Cycloheximide is also soluble in most organic solvents, including ethanol, with the exception of saturated hydrocarbons.14 Storage/Stability Store desiccated at 2-8 °C. The product as supplied should be stable for 5 years if properly stored. >일반적으로 protein synthesis inhibitor로 사용되는 cycloheximide(CHX) 의 half life가 어느 정도 되는지 알고 싶습니다. > >저는 실험할 때, 24시간까지 CHX 처리하여 단백질 합성이 억제되는 효과를 보았는데요.. > >실제 CHX half life는 4~6시간이라고 누군가 그러더군요.. > >실제 실험에서 많이 사용되는 kinase inhibitors (SP600125, SB series, PD98059, LY294002)들도 chemical activity가 24시간 내라고 하는데, 실제로 그런 것인지 궁금합니다... > >논문들을 search 해봐도 그런 것은 잘 나오지 않더라구요... > >누군가의 말보다 정확하게 통계를 내거나 실험한 data가 어딘가 있는지 궁금합니다. > >많은 답변 부탁드려요...
    Cycloheximide가 반감기가 있나요? Sigma catalog에서 보면 cyclohexamide의 경우 용액을 만들어 pH 3-5상태에서 냉장 보관을 하면 매우 안정적인것으로 되어 있으며, 냉동 상태로는 18개월을 간다고 하는데.. 다음은 sigma catalogue에 나와 있는 cycloheximide에 대한 설명입니다. Preparation Instructions Cycloheximide has been reported to be soluble up to 2% (w/v) in water (20 mg/ml). The powder will dissolve slowly in water and this process may be aided by mixing or sonication. Aqueous solution stability is pH dependent. Solutions are stable for several weeks in the pH range of 3 to 5, which is the range optimal for stability. For longer term solution storage, refrigeration is suggested. Solutions refrigerated over 18 months, retained 75% of the original activity.13 Solutions prepared in distilled water may be sterile filtered or autoclaved without serious loss of activity.13 Autoclaving of medium containing cycloheximide is not recommended. The sterile cycloheximide solution should be added to sterile broth or cooled, sterile, melted agar.13 Boiling for one hour at pH 7 destroys activity, but no loss of activity is observed after 15 minutes. Under acidic conditions (pH 2), activity is not destroyed after one hour of boiling.14 Under dilute alkali conditions, decomposition occurs rapidly in solution at room temperature with the formation of 2,4-dimethylcyclohexanone.14 Cycloheximide is also soluble in most organic solvents, including ethanol, with the exception of saturated hydrocarbons.14 Storage/Stability Store desiccated at 2-8 °C. The product as supplied should be stable for 5 years if properly stored. >일반적으로 protein synthesis inhibitor로 사용되는 cycloheximide(CHX) 의 half life가 어느 정도 되는지 알고 싶습니다. > >저는 실험할 때, 24시간까지 CHX 처리하여 단백질 합성이 억제되는 효과를 보았는데요.. > >실제 CHX half life는 4~6시간이라고 누군가 그러더군요.. > >실제 실험에서 많이 사용되는 kinase inhibitors (SP600125, SB series, PD98059, LY294002)들도 chemical activity가 24시간 내라고 하는데, 실제로 그런 것인지 궁금합니다... > >논문들을 search 해봐도 그런 것은 잘 나오지 않더라구요... > >누군가의 말보다 정확하게 통계를 내거나 실험한 data가 어딘가 있는지 궁금합니다. > >많은 답변 부탁드려요...
    등록된 댓글이 없습니다.
  • 답변

    이정원님의 답변

    CHX half life는 5시간 정도가 맞습니다. 실험조건 즉, 37도의 세포배양조건에서 처리시에 4-6시간마다 다시 처리해야 한다는 paper를 몇 군데에서 찾을 수 있습니다. 내가 바빠서... 그리고 LY는 아주 안정합니다. SP도 아마... PD와 U0126는 20-40 uM처리 24시간 후 다시 pErks가 다시 살아나는 cell들이 있을 수 있죠. 누구가 paper에서 몇시간마다 처리 해야 한다고 표기하는 시대는 아닙니다. Paper 들에서 각 inhibitor를 치고 어느 시간까지 보던가를 파악하는 게 현명할 겁니다. >일반적으로 protein synthesis inhibitor로 사용되는 cycloheximide(CHX) 의 half life가 어느 정도 되는지 알고 싶습니다. > >저는 실험할 때, 24시간까지 CHX 처리하여 단백질 합성이 억제되는 효과를 보았는데요.. > >실제 CHX half life는 4~6시간이라고 누군가 그러더군요.. > >실제 실험에서 많이 사용되는 kinase inhibitors (SP600125, SB series, PD98059, LY294002)들도 chemical activity가 24시간 내라고 하는데, 실제로 그런 것인지 궁금합니다... > >논문들을 search 해봐도 그런 것은 잘 나오지 않더라구요... > >누군가의 말보다 정확하게 통계를 내거나 실험한 data가 어딘가 있는지 궁금합니다. > >많은 답변 부탁드려요...
    CHX half life는 5시간 정도가 맞습니다. 실험조건 즉, 37도의 세포배양조건에서 처리시에 4-6시간마다 다시 처리해야 한다는 paper를 몇 군데에서 찾을 수 있습니다. 내가 바빠서... 그리고 LY는 아주 안정합니다. SP도 아마... PD와 U0126는 20-40 uM처리 24시간 후 다시 pErks가 다시 살아나는 cell들이 있을 수 있죠. 누구가 paper에서 몇시간마다 처리 해야 한다고 표기하는 시대는 아닙니다. Paper 들에서 각 inhibitor를 치고 어느 시간까지 보던가를 파악하는 게 현명할 겁니다. >일반적으로 protein synthesis inhibitor로 사용되는 cycloheximide(CHX) 의 half life가 어느 정도 되는지 알고 싶습니다. > >저는 실험할 때, 24시간까지 CHX 처리하여 단백질 합성이 억제되는 효과를 보았는데요.. > >실제 CHX half life는 4~6시간이라고 누군가 그러더군요.. > >실제 실험에서 많이 사용되는 kinase inhibitors (SP600125, SB series, PD98059, LY294002)들도 chemical activity가 24시간 내라고 하는데, 실제로 그런 것인지 궁금합니다... > >논문들을 search 해봐도 그런 것은 잘 나오지 않더라구요... > >누군가의 말보다 정확하게 통계를 내거나 실험한 data가 어딘가 있는지 궁금합니다. > >많은 답변 부탁드려요...
    등록된 댓글이 없습니다.