KOSEN 한인과학기술자네트워크

닫기

더 많은 혜택을 위해
로그인 하세요.

지식나눔

지식나눔

Protein 정량 중 Lowry 법에서 standard curve에 대해...

2005-11-03 org.kosen.entty.User@71a0a648 강효찬(taifun)
  • 2
Lowry법으로 단백정량을 하는데, standard curve를 작성해서 농도를 구하는데, 하나의 의문점이 생겼습니다. 혹시 Lowry법으로 단백정량을 하시는 분은 도움을 부탁드립니다. 다름이 아니오라... Standard curve 작성시 저는 1mg/ml BSA를 가지고 0, 10, 20, 30, 50, 75, 100 microgram의 농도가 되게 희석하여 측정을 했습니다. 이때 나오는 그래프를 즉, 추세선을 직선으로 해야하나요? 아님 곡선으로 해야하나요? 거의 직선에 가까운 곡선이 나오긴 하는데, 정확한 정량을 위해서 어떤 식으로 해야하는지 궁금합니다. 일반적으로 추세선을 구해서 이 식에 샘플의 측정 OD를 대입해서 농도를 구했는데, Lowry법은 조금 다르다는 의견이 있어서 말입니다... 부탁드립니다...
  • Lowry
  • protein
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변하기
답변 2
  • 답변

    윤철희님의 답변

    2005-11-03
    • 0
    라우리단백질 정량을 키트를 사서 사용하시면 반응이 나타날때 거의 직선에서 잡히도록 Standard curve를 추천하고 있을것입니다. 일반적으로는 농도가 높아질때 아주 낮은 농도와 아주 높은 농도에서 곡선을 그리게 되는데, 이것이 걱정되신다면 4-polynomial graph를 그리시고 그 식에서 값을 구하심이 좋을듯 합니다. 참고로 엑셀에서 scatter로 그라프를 그린 후 format trendline으로 들어가셔서 option에서 display equation, R^2하시면 공식까지 알려줍니다. 그리고는 샘플값을 이 공식에 넣으시면 값을 구할 수 있습니다. 거의 직선이라면 아마 두 방법이 거의 비슷하게 나올것으로 예상됩니다. > Lowry법으로 단백정량을 하는데, standard curve를 작성해서 농도를 구하는데, 하나의 의문점이 생겼습니다. > 혹시 Lowry법으로 단백정량을 하시는 분은 도움을 부탁드립니다. >다름이 아니오라... > Standard curve 작성시 저는 1mg/ml BSA를 가지고 0, 10, 20, 30, 50, 75, 100 microgram의 농도가 되게 희석하여 측정을 했습니다. 이때 나오는 그래프를 즉, 추세선을 직선으로 해야하나요? 아님 곡선으로 해야하나요? 거의 직선에 가까운 곡선이 나오긴 하는데, 정확한 정량을 위해서 어떤 식으로 해야하는지 궁금합니다. > 일반적으로 추세선을 구해서 이 식에 샘플의 측정 OD를 대입해서 농도를 구했는데, Lowry법은 조금 다르다는 의견이 있어서 말입니다... > 부탁드립니다...
    답변수정
    라우리단백질 정량을 키트를 사서 사용하시면 반응이 나타날때 거의 직선에서 잡히도록 Standard curve를 추천하고 있을것입니다. 일반적으로는 농도가 높아질때 아주 낮은 농도와 아주 높은 농도에서 곡선을 그리게 되는데, 이것이 걱정되신다면 4-polynomial graph를 그리시고 그 식에서 값을 구하심이 좋을듯 합니다. 참고로 엑셀에서 scatter로 그라프를 그린 후 format trendline으로 들어가셔서 option에서 display equation, R^2하시면 공식까지 알려줍니다. 그리고는 샘플값을 이 공식에 넣으시면 값을 구할 수 있습니다. 거의 직선이라면 아마 두 방법이 거의 비슷하게 나올것으로 예상됩니다. > Lowry법으로 단백정량을 하는데, standard curve를 작성해서 농도를 구하는데, 하나의 의문점이 생겼습니다. > 혹시 Lowry법으로 단백정량을 하시는 분은 도움을 부탁드립니다. >다름이 아니오라... > Standard curve 작성시 저는 1mg/ml BSA를 가지고 0, 10, 20, 30, 50, 75, 100 microgram의 농도가 되게 희석하여 측정을 했습니다. 이때 나오는 그래프를 즉, 추세선을 직선으로 해야하나요? 아님 곡선으로 해야하나요? 거의 직선에 가까운 곡선이 나오긴 하는데, 정확한 정량을 위해서 어떤 식으로 해야하는지 궁금합니다. > 일반적으로 추세선을 구해서 이 식에 샘플의 측정 OD를 대입해서 농도를 구했는데, Lowry법은 조금 다르다는 의견이 있어서 말입니다... > 부탁드립니다...
    등록된 댓글이 없습니다.
  • 답변

    황권택님의 답변

    2005-11-06
    • 0
    BSA농도가 100microgram까지는 거의 직선이 나올것입니다. 만약 직선구간을 지나 곡선으로 나아간다면 직선구간만을 표준곡선구간으로 정하십시요. Bradford protein assay법은 range가 훨씬 넓지만 민감도에선 Lowry assay가 나은거 같습니다. 그리고 위에 조언하신님의 따라 equation을 얻고 시료의 농도도 직선구간에 OD가 나올수 있도록 조정(희석)하여 구하셔야 할것입니다. 좋은 결과 있으시기를........ > Lowry법으로 단백정량을 하는데, standard curve를 작성해서 농도를 구하는데, 하나의 의문점이 생겼습니다. > 혹시 Lowry법으로 단백정량을 하시는 분은 도움을 부탁드립니다. >다름이 아니오라... > Standard curve 작성시 저는 1mg/ml BSA를 가지고 0, 10, 20, 30, 50, 75, 100 microgram의 농도가 되게 희석하여 측정을 했습니다. 이때 나오는 그래프를 즉, 추세선을 직선으로 해야하나요? 아님 곡선으로 해야하나요? 거의 직선에 가까운 곡선이 나오긴 하는데, 정확한 정량을 위해서 어떤 식으로 해야하는지 궁금합니다. > 일반적으로 추세선을 구해서 이 식에 샘플의 측정 OD를 대입해서 농도를 구했는데, Lowry법은 조금 다르다는 의견이 있어서 말입니다... > 부탁드립니다...
    답변수정
    BSA농도가 100microgram까지는 거의 직선이 나올것입니다. 만약 직선구간을 지나 곡선으로 나아간다면 직선구간만을 표준곡선구간으로 정하십시요. Bradford protein assay법은 range가 훨씬 넓지만 민감도에선 Lowry assay가 나은거 같습니다. 그리고 위에 조언하신님의 따라 equation을 얻고 시료의 농도도 직선구간에 OD가 나올수 있도록 조정(희석)하여 구하셔야 할것입니다. 좋은 결과 있으시기를........ > Lowry법으로 단백정량을 하는데, standard curve를 작성해서 농도를 구하는데, 하나의 의문점이 생겼습니다. > 혹시 Lowry법으로 단백정량을 하시는 분은 도움을 부탁드립니다. >다름이 아니오라... > Standard curve 작성시 저는 1mg/ml BSA를 가지고 0, 10, 20, 30, 50, 75, 100 microgram의 농도가 되게 희석하여 측정을 했습니다. 이때 나오는 그래프를 즉, 추세선을 직선으로 해야하나요? 아님 곡선으로 해야하나요? 거의 직선에 가까운 곡선이 나오긴 하는데, 정확한 정량을 위해서 어떤 식으로 해야하는지 궁금합니다. > 일반적으로 추세선을 구해서 이 식에 샘플의 측정 OD를 대입해서 농도를 구했는데, Lowry법은 조금 다르다는 의견이 있어서 말입니다... > 부탁드립니다...
    등록된 댓글이 없습니다.
목록
목록