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지식나눔

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klebsiella pneumoniae의 genomic DNA prep 방법이요..

2005-11-07 org.kosen.entty.User@7bd3aff8 장선주(jangseonju)
  • 1
kit와 여러 manual을 이용한 방법으로 뽑았는데, 많이 끌리는 현상이 나타납니다. 끌린 DNA를 phenol처리를 해도 결과가 비슷한 것으로 보아, 끌리는 것이 단백질은 아닌것으로 여겨지고, 아마도 DNA가 잘린것으로 보입니다. 전기영동했을때, 전체적으로 smear한 band가 나옵니다.(제한효소로 자른것처럼..) 잘 뽑힐만한 방법이 없을까요? 제가 이전에 다른 균주들을 뽑았던 방법은 다 해보았지만, 결과가 신통치 않습니다.. 매뉴얼 추천 부탁드립니다..
  • klebsiella pneumoniae
  • gram negative
  • genomic DNA prep
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답변 1
  • 답변

    김성훈님의 답변

    2005-11-08
    • 0
    lysozyme 과 protease를 넣고 detergent 가 들어 있는 cell lysis buffer를 사용하여 cell lysis를 하신뒤에 유리 섬유로된 일회용 필터 kit을 쓰시면 끌리는 현상 없이 single band로 깨끗하게 뽑으실수 있을 겁니다. 혹시 메일 주시면 더욱 상세하게 가르쳐 드리죠 (solution 이라든가 쓰고 있는 kit)
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    lysozyme 과 protease를 넣고 detergent 가 들어 있는 cell lysis buffer를 사용하여 cell lysis를 하신뒤에 유리 섬유로된 일회용 필터 kit을 쓰시면 끌리는 현상 없이 single band로 깨끗하게 뽑으실수 있을 겁니다. 혹시 메일 주시면 더욱 상세하게 가르쳐 드리죠 (solution 이라든가 쓰고 있는 kit)
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