2005-11-09
org.kosen.entty.User@73e56058
김설희(aprilseol)
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total RNA 에서 reverse transcription으로 얻어진 cDNA 농도를
구하는 방법 또는 계산식을 아시는 분을 알려주세요
- cDNA
- RT
- RNA
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답변 3
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답변
오정수님의 답변
2005-11-10- 0
>total RNA 에서 reverse transcription으로 얻어진 cDNA 농도를 >구하는 방법 또는 계산식을 아시는 분을 알려주세요 제가 알기로는 불가능한것으로 알고 있습니다. 단지 RT를 할때 동량의 RNA를 넣어주고 동일한 조건으로 하는 것이 유일한 방법인걸로 생각되네요.. 그리고, RT를 한후 각각의 cDNA를 이용하여 housekeeping gene을 PCR하여 Normalization시키는 것으로 알고 있습니다.. -
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최양애님의 답변
2005-11-15- 0
total RNA reverse transcription후 얻어진 cDNA 농도? total RNA reverse transcription 후 반응 용액에는 RNA도 있를테니까, RNase를 처리하여서 RNA를 제거나고(시판되는 컬럼 사용), 흡광도를 읽어 단일 가닥 핵산 농도 구하는 식(CSH에서 출판한 Molecular coloning 에 있음)에 적용하여 구하면 됨. 실험실 상황( 정제 column 등)이 여의치 않다면, RNase 처리 후에 농도를 알고 있는 DNA과 함께 전기 영동하고, 비교- 어림하는 것도 방법, 그외에 agar plate에서 하는 방법도 있음. 무엇보다도, 실험의 목적과 자신의 실험 상황에 최선의 방법을 택해야 하리라고 판단됩니다. 도움이 되었으면 합니다. >total RNA 에서 reverse transcription으로 얻어진 cDNA 농도를 >구하는 방법 또는 계산식을 아시는 분을 알려주세요 -
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DELETED님의 답변
2010-01-09- 0
>total RNA 에서 reverse transcription으로 얻어진 cDNA 농도를>구하는 방법 또는 계산식을 아시는 분을 알려주세요 Re: 제생각에 정확히 정량 할 수 있는 방법이 없는 것으로 알고 있습니다. 저 같은 경우, RT 후 1/5 dilution하여 PCR시 사용하고 있습니다. 그정도만 해도 충분하더군요. 참 RNA는 1ug 사용하구요..