지식나눔

혹시 cell cycle arrest해보신분... cell synchronization말이에요...

안녕하세요?? 저는 NIH3T3 cell의 M phase에 약물을 처리하기 위해서 cell cycle arrest를 setting중인 학위생입니다. NIH3T3 cell을 실험하기 전에 HeLa cell을 가지고 double thymidine block을 했는데 FACS 측정시 원하는대로 실험결과가 아주 잘 나왔었습니다. 그래서 NIH3T3 cell도 같은 방법으로 해봤는데 안되더군요. 해서 first block time을 바꿔가며 해보고 release time도 바꿔가며 해봐도 HeLa에서의 결과가 안나오더라구 요. 해서 저의 질문은 이렇습니다. 1) 혹시 NIH3T3 cell에 double thymidine block으로 cell cycle arrest를 해보신 분이 계시다면 첫번째 block과 release, 그리고 두번째 block의 시간 좀 알려주실수 있는지...? 2) double thymidine block 외에 NIH3T3 cell의 M phase에 cell cycle을 arrest시킬 수 있는 방법이 있는지...?? 참고로 thymidine처리시에는 G1/S phase쪽은 block은 잘 됩니다. 다만 제가 원하는 것은 M phase에 cell들이 모이는 것이고 nocodazole같은 약물로 synchronization을 하게 되면 다시 release할 때 죽는 세포들이 많아서 그 방법은 제외시 키고 있습니다. M phase arrest후에 release했을 때 cell damage가 없는 방법을 알고 싶습니다. 너무 길게 썼네요. 하지만 제가 질문한 것에 관심있으시거나 조언 주실 수 있으신 분은 리플 혹은 메일 주소 좀 남겨주세요. 이 실험만 벌써 10번은 넘게해서 넘 힘들고 지치네요. 감사합니다 ^^*
  • cell cycle arrest
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  • double thymidine block
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