지식나눔

유리 아미노산 정량

안녕하세요... 유리 아미노산 분석을 하려합니다. 논문검색 도 안되고 해서... 관련 자료 부탁드립니다. Guysen, J., D. J. Tipper, and J. L. Strominger. 1966. Method in Enzymol. 53: 685-699 좋은 하루 보내세요...
  • Ghuysen method
  • amino acid
  • quantitave analysis
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답변 2
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    배우철님의 답변

    유리아미노산이 free amino acid를 의미하는 것인가요? 그렇다면 아미노산들이 결합되어 있는 펩타이드나 단백질이 아니라 알라닌, 트레오닌 식으로 각각 분리되어 아미노기(-NH₂)와 카르복시기(-COOH)가 해리한 상태로 있는 아미노산을 말씀하시는 것 같은데요...어떤 분석을 생각하시는 지 모르겠습니다.. 우선 떠오르는 것은 원하시는 물질에서 유리 아미노산 함량을 분석하는 것이 있습니다. 이 경우에는 amino acid analyzer 또는 HPLC로 amino acid 분석용 컬럼를 이용하면 각 아미노산의 종류와 함량을 측정할 수 있습니다. 이 경우에도 아미노산 음료 같은 제품은 전처리가 단순하지만 단백질 같은 경우에는 산분해로 펩타이드를 분해하여 유리 아미노산을 만든 후에 phenylisothiocyanate 등으로 유도체화해야 합니다.
    유리아미노산이 free amino acid를 의미하는 것인가요? 그렇다면 아미노산들이 결합되어 있는 펩타이드나 단백질이 아니라 알라닌, 트레오닌 식으로 각각 분리되어 아미노기(-NH₂)와 카르복시기(-COOH)가 해리한 상태로 있는 아미노산을 말씀하시는 것 같은데요...어떤 분석을 생각하시는 지 모르겠습니다.. 우선 떠오르는 것은 원하시는 물질에서 유리 아미노산 함량을 분석하는 것이 있습니다. 이 경우에는 amino acid analyzer 또는 HPLC로 amino acid 분석용 컬럼를 이용하면 각 아미노산의 종류와 함량을 측정할 수 있습니다. 이 경우에도 아미노산 음료 같은 제품은 전처리가 단순하지만 단백질 같은 경우에는 산분해로 펩타이드를 분해하여 유리 아미노산을 만든 후에 phenylisothiocyanate 등으로 유도체화해야 합니다.
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    하재석님의 답변

    윗분 말씀대로 질문의 정확한 의미 파악이 잘 안됩니다. 좀더 자세하게 질문하심이..... 단백질 분해효소의 활성측정을 효소에 의해 분해된 유리된 아미노산 혹은 펩타이드로 정량화하기 위해 사용하는 방법으로는 Folin & Ciocalteu's phenol reagent를 이용한 Lowry method와, bicinchoninic acid를 이용한 BCA method 정도가 있습니다. 방법은 구글에서 검색하면 손쉽게 찾을 수 있고요, 두 방법 모두 spectrophotometer를 이용해서 측정 합니다. BCA method의 경우에는 PIERCE에서 assay kit을 만들어서 파는것도 있고요, 다른 회사의 제품들도 많이 있습니다. 이런 목적이 아니고 윗분의 답변처럼 특정 아미노산의 조성을 정량하는 목적이라면 amino acid analyzer를 이용하시는게 좋으실 듯.....
    윗분 말씀대로 질문의 정확한 의미 파악이 잘 안됩니다. 좀더 자세하게 질문하심이..... 단백질 분해효소의 활성측정을 효소에 의해 분해된 유리된 아미노산 혹은 펩타이드로 정량화하기 위해 사용하는 방법으로는 Folin & Ciocalteu's phenol reagent를 이용한 Lowry method와, bicinchoninic acid를 이용한 BCA method 정도가 있습니다. 방법은 구글에서 검색하면 손쉽게 찾을 수 있고요, 두 방법 모두 spectrophotometer를 이용해서 측정 합니다. BCA method의 경우에는 PIERCE에서 assay kit을 만들어서 파는것도 있고요, 다른 회사의 제품들도 많이 있습니다. 이런 목적이 아니고 윗분의 답변처럼 특정 아미노산의 조성을 정량하는 목적이라면 amino acid analyzer를 이용하시는게 좋으실 듯.....
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