지식나눔

ELISA assay

Rabbit serum을 ELISA assay 하려고 하는데, 좋은 secondary antibody와 substrate 추천 바랍니다. 종류가 너무 많아서 고르기가 힘드네요.. 제가 다시보아도 질문이 좀이상하네요. 죄송. 첫째는 저희가 다른회사에 의뢰하여 제작한 rabbit antibody를 titration 하려고 하고, 참고로 항체제작은 E.coli에서 발현한 단백질을 사용하였는데 최근 insect cell에서 발현시킨 단백질로 titer를 다시 측정하려고 합니다. 또한 이 Rabbit antibody를 antigen으로 정제하여 human plasma 에 있는 antigen을 ELISA로 측정(screen)하려고 합니다. 시중에 나와있는 많은 제품중 어느것이 좋은지 추천 부탁드립니다.
  • antibody
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답변 3
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    송지영님의 답변

    혈청 중 측정하고자 하는 부분이 무엇인지 알아야 추천을 할 수 있을 것 같습니다만... >Rabbit serum을 ELISA assay 하려고 하는데, 좋은 secondary antibody와 substrate 추천 바랍니다. 종류가 너무 많아서 고르기가 힘드네요..
    혈청 중 측정하고자 하는 부분이 무엇인지 알아야 추천을 할 수 있을 것 같습니다만... >Rabbit serum을 ELISA assay 하려고 하는데, 좋은 secondary antibody와 substrate 추천 바랍니다. 종류가 너무 많아서 고르기가 힘드네요..
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    정환석님의 답변

    > >Rabbit serum을 ELISA assay 하려고 하는데, 좋은 secondary antibody와 substrate 추천 바랍니다. 종류가 너무 많아서 고르기가 힘드네요.. 어떤실험을 하시는지 모르겠는데 rabbit에서 serum을 얻으셨다니 궁금하군요.. anti-rabbit 목적단백질 을 사용하시면 되고요 2차는 1차를 잡을수 있는 같은 계열로 사용하시면 됩니다. 예를 들면 선생님께서 TNFa를 잡고자하신다면 rat anti-rabbit TNF-a를 1차로 2차는 biotinylated anti-rabbit IgG를 사용하시고 Avidin peroxidase를 붙인후 ABTS나TMB를 기질로 쓰시면 될듯합니다. 저희 경우에는 BD에서 나온 OPTEIA 킷을 사용하는데 결과는 잘나옵니다.
    > >Rabbit serum을 ELISA assay 하려고 하는데, 좋은 secondary antibody와 substrate 추천 바랍니다. 종류가 너무 많아서 고르기가 힘드네요.. 어떤실험을 하시는지 모르겠는데 rabbit에서 serum을 얻으셨다니 궁금하군요.. anti-rabbit 목적단백질 을 사용하시면 되고요 2차는 1차를 잡을수 있는 같은 계열로 사용하시면 됩니다. 예를 들면 선생님께서 TNFa를 잡고자하신다면 rat anti-rabbit TNF-a를 1차로 2차는 biotinylated anti-rabbit IgG를 사용하시고 Avidin peroxidase를 붙인후 ABTS나TMB를 기질로 쓰시면 될듯합니다. 저희 경우에는 BD에서 나온 OPTEIA 킷을 사용하는데 결과는 잘나옵니다.
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    배우철님의 답변

    워낙 여러 회사에서 제품들이 많이 나와서 일반화할 수는 없지만 2차 Antibody를 권하라면… 저는 Santa Cruz 제품을 권하고 싶습니다… 제가 몇 군데 제품을 써본 경험에서는1차나 2차 모두 이 회사 제품이 가장 좋았었습니다…앞에 설명하신 분이 권하신 제품도 괜찮을 것 같습니다.. http://www.scbt.com/catalog/secondary_antibodies.lasso?-Token.order_id=5452239 위의 사이트에서 2차 antibody 종류를 확인할 수 있습니다.
    워낙 여러 회사에서 제품들이 많이 나와서 일반화할 수는 없지만 2차 Antibody를 권하라면… 저는 Santa Cruz 제품을 권하고 싶습니다… 제가 몇 군데 제품을 써본 경험에서는1차나 2차 모두 이 회사 제품이 가장 좋았었습니다…앞에 설명하신 분이 권하신 제품도 괜찮을 것 같습니다.. http://www.scbt.com/catalog/secondary_antibodies.lasso?-Token.order_id=5452239 위의 사이트에서 2차 antibody 종류를 확인할 수 있습니다.
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