2006-03-15
org.kosen.entty.User@4cd87dea
정용태(franken3)
- 2
버섯의 균사체의 총핵산을 측정할려고 하는데
STS법이 있더군요..
근데 책에 있는 내용을 정확히 몰라서 . 질문드립니다.
정확한 method를 알고 계신 고수분들 갈켜 주세요.^^
- STS
- Schmidt-Thannhauser-Schneider
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 2
-
답변
배우철님의 답변
2006-03-17- 0
해양생물에서 여러가지 영양요소를 측정한 논문입니다.. 이 논문의 2. Material and Method 중에서 2.2 Nucleic aicd analysis에 변형된 STS 법이 있습니다.. -
답변
배우철님의 답변
2006-03-17- 0
아주 오래전에 버섯에서 핵산 정량할 때 사용했는데요...정확히 STS법인지는 모르겠습니다... 핵산 정량법 1. 해당 물질 100g을 4분간 동량의 95% 에탄올과 균일하게 갈고 여과한다. 찌꺼기는 다시 에탄올 100ml로 재추출하여 여과한다 2. 찌꺼기를 4분가 Me2CO 100ml에 다시 균일하게 갈고 여과 후 찌꺼기는 여과지 사이에 끼워서 건조한다. 3. 건조된 찌꺼기를 차가운 5%-HClO4 100ml에 현탁하여 여과하고 여액은 버린다. 그리고 찌꺼기를 다시 에탄올 100ml로 세척하고 다음 Me2CO 100ml로 세척한 뒤 건조한다. 4. 이렇게 얻은 찌꺼기를 미리 NaHCO3를 가지고 pH 7.5로 조절한 10% NaCl 100ml로 15분간 100도에서 가열하여 RNA를 추출한다. 5. 냉각한 후 여과한 찌꺼기를 20분간 70도에서 0.5M HClO4 100ml로 DNA를 추출한다. 6. NaCl 추출액 1ml을 취하고 oricinol 시액 1ml을 가하여 100도에서 10분간 가열하고 정색되는 녹색을 640nm에서 측정하고 검량선에서 RNA 양을 구한다. Oricinol 시액은 10% FeCl3 0.5ml에 orcinol 1g을 녹이고 HCl을 가하여 100ml로 만들고, 시험 전에 조제한다. 7. HClO4 추출액 1ml을 취하여 diphenylamine 시액 2ml을 가하여 100도에서 10분간 가열하고 정색되는 청색을 600nm에서 측정하고 검량선에서 DNA양을 구한다. diphenylamine 시액은 초산 100ml에 diphenylamine 1g을 녹이고 H2SO4 2.75ml을 가한다. 시험 전에 조제한다.