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지식나눔

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in-cell western assay 란?

2006-03-30 org.kosen.entty.User@5bd37c34 문준섭(moonhero)
  • 1
Li-COR 사에서 판매하는 in-cell wetern assay system 이라는 기계를 보았습니다. 혹시 사용한 경험이 있으시거나 장치에 대해서 잘 알고 계시는 분 있으시면 이 장치에 대한 장,단점 그리고 이 장치를 활용한 논문에 대한 정보를 얻고 싶습니다. 많은 조언부탁드립니다.
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답변 1
  • 답변

    정철웅님의 답변

    2006-03-30
    • 0
    in-cell western assay를 직접 해보지는 않았지만 비슷한 시스템을 많이써봤습니다. 기본적으로 immunocytochemistry를 96well or 384well plate에서 바로하는 시스템이라고 보시면 됩니다. 이 system을 사용하려면 일단 대량으로 immunocytochemistry를 할 필요가 있는 연구소여야 수지 타산이 맞을 것입니다. 어쩌다가 2-30개씩 염색한다면 배보다 배꼽이 클것입니다. 제약회사나 대형 프로젝트 수행하는 것이 아니라면 다시 생각하시기 바랍니다. 어？든 장점이라면 세포상태에서 하기 때문에 단백질 구조 특이적인 항체를 이용한 정성적, 정량적 실험을 대량으로 할수 있다는 것입니다. 하지만 이런 항체들도 대부분 membrane상에서 western이 가능하기 때문에 굳이 이렇게까지 할 필요는 없을 것 같고 주변에 기계가 있다면 논문에 도움은 되겠네요. 참고 논문은 A 384-well cell-based phospho-ERK assay for dopamine D2 and D3 receptors(2004). Analytical Biochemistry. 333. 265-272 이 있는데 http://www.licor.com/bio/PDF/ICW_Brochure.pdf 에 가면 자세한 설명 있고, 논문이 더 필요하시면 회사에 직접 연락하시면 기꺼이 보내줄 겁니다.
    답변수정
    in-cell western assay를 직접 해보지는 않았지만 비슷한 시스템을 많이써봤습니다. 기본적으로 immunocytochemistry를 96well or 384well plate에서 바로하는 시스템이라고 보시면 됩니다. 이 system을 사용하려면 일단 대량으로 immunocytochemistry를 할 필요가 있는 연구소여야 수지 타산이 맞을 것입니다. 어쩌다가 2-30개씩 염색한다면 배보다 배꼽이 클것입니다. 제약회사나 대형 프로젝트 수행하는 것이 아니라면 다시 생각하시기 바랍니다. 어？든 장점이라면 세포상태에서 하기 때문에 단백질 구조 특이적인 항체를 이용한 정성적, 정량적 실험을 대량으로 할수 있다는 것입니다. 하지만 이런 항체들도 대부분 membrane상에서 western이 가능하기 때문에 굳이 이렇게까지 할 필요는 없을 것 같고 주변에 기계가 있다면 논문에 도움은 되겠네요. 참고 논문은 A 384-well cell-based phospho-ERK assay for dopamine D2 and D3 receptors(2004). Analytical Biochemistry. 333. 265-272 이 있는데 http://www.licor.com/bio/PDF/ICW_Brochure.pdf 에 가면 자세한 설명 있고, 논문이 더 필요하시면 회사에 직접 연락하시면 기꺼이 보내줄 겁니다.
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