2006-04-03
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황동규(dong3772)
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재조합 단백질을 E.coli에서 발현시킬때 soluble하게 얻기위한 방법으로 C41(DE3) and C43(DE3)같은 competent cell을 쓰는거 같은데 그 원리에 대해 자세히 알고 싶습니다..
그것에 관한 자료도 좋구요.. 부탁드립니다.
- soluble expression
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답변 1
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답변
배우철님의 답변
2006-04-04- 0
competent cell에 대해서 전반적으로 알고 싶으신 것인가요? Competent cell이란 정상적인 세균에 화학적 처리를 하여 DNA가 잘 들어갈 수 있게 만든 cell을 의미합니다. 아니면 C41(DE3)과 C43(DE3)에 대해서 알고 싶으신 것인가요? 제가 알기로는 C41(DE3)과 C43(DE3)가 수용성 단백질 생산율이 엄청나게 높지는 않은 것으로 알고 있습니다.. 단순히 단백질을 과발현시키는 strain입니다.. BL21에서 유래했고, 독성이 높은 단백질에 내성을 발휘하기 때문에 목적 단백질이 진정세균, 고세균, 효모, 식물, 포유류 등의 독성이 있는 단백질이어도 생산에 적당합니다...형질전환 효율은 1x 10 6승 이상이고... BL21처럼 λDE3 용원균이고 lacUV5 프로모터에 제어를 받습니다. T7 RNA 중합효소 유전자도 있기 때문에 IPTG 첨가로 T7 프로모터 하류의 목적 유전자의 발현을 유도합니다... >재조합 단백질을 E.coli에서 발현시킬때 soluble하게 얻기위한 방법으로 C41(DE3) and C43(DE3)같은 competent cell을 쓰는거 같은데 그 원리에 대해 자세히 알고 싶습니다.. >그것에 관한 자료도 좋구요.. 부탁드립니다.