2006-05-01
org.kosen.entty.User@6401f56f
권순일(soonil)
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paraffin section에 관하여 질문드립니다.
mouse의 organ이 아닌 zebrafish embryo를 가지고 paraffin section을 할려고 하는데 10um 밑으로는 절단면이 깨끗하지 않습니다.
zebrafish의 yalk부분이 뜯겨져 나가는 현상이 관찰되어집니다.
dehydration이나 impregnation에 문제가 있는 것일까요?
zebrafish embryo의 크기를 길이가 7mm정도이고 두께는 제일 두꺼운 쪽이 1mm 정도 입니다.
EtOH에서 series 별로 dehydration을 하고 Xylene:paraffin을 각각 15분 30분 1시간으로 하여 test 해 보았습니다. paraffin에서는 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 2일, 3일, 5일로 해보았고요.
그런데 모두 8um부터 yalk가 뜯겨져 나갑니다.
자르는 기술의 문제일까요? 아니면 실험과정에 문제일까요?
조언부탁드립니다.
- paraffin section
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
정철웅님의 답변
2006-05-31- 0
>paraffin section에 관하여 질문드립니다. > >mouse의 organ이 아닌 zebrafish embryo를 가지고 paraffin section을 할려고 하는데 10um 밑으로는 절단면이 깨끗하지 않습니다. > >zebrafish의 yalk부분이 뜯겨져 나가는 현상이 관찰되어집니다. > >dehydration이나 impregnation에 문제가 있는 것일까요? > >zebrafish embryo의 크기를 길이가 7mm정도이고 두께는 제일 두꺼운 쪽이 1mm 정도 입니다. > >EtOH에서 series 별로 dehydration을 하고 Xylene:paraffin을 각각 15분 30분 1시간으로 하여 test 해 보았습니다. paraffin에서는 2시간, 4시간, 8시간, 12시간, 2일, 3일, 5일로 해보았고요. > >그런데 모두 8um부터 yalk가 뜯겨져 나갑니다. > >자르는 기술의 문제일까요? 아니면 실험과정에 문제일까요? > >조언부탁드립니다. 1. dehydration을 더 연장시켜보시기 바랍니다. dehydration이 충분하지 않으면 뒷 스텝이 완전하게 일어나지 않을 수 있습니다. 자르는 기술 문제를 언급하신 것은 이것이 처음이시라는 것인지요? 다른 샘플은 잘 되었는데 이번 것이 안 되었다면 기술 때문 만은 아니겠죠? cryosection으로의 전환도 한번 고려해 보시기 바랍니다.