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CCD-986sk이란 cell을 키워보신분 계신가요?

CCD-986sk이란 cell을 키워보신분 계신가요? human skin fibroblast cell인데 무지 안자라요.. 세포주은행에 문의하니 normal cell이라 원래 잘 안자란다고 하더군요 그치만 doubling time이 넘 길어요 80-90% confluent 상태에서 1:2 split했는데 일주일이 지나도 60%정도밖에 안되는것 같네요... 이 cell을 키워보신분들의 조언을 듣고 싶습니다..
  • CCD-986sk
  • human skin fibroblast cell
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답변 3
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    현정미님의 답변

    >CCD-986sk이란 cell을 키워보신분 계신가요? >human skin fibroblast cell인데 무지 안자라요.. >세포주은행에 문의하니 normal cell이라 원래 잘 안자란다고 하더군요 >그치만 doubling time이 넘 길어요 >80-90% confluent 상태에서 1:2 split했는데 일주일이 지나도 60%정도밖에 안되는것 같네요... >이 cell을 키워보신분들의 조언을 듣고 싶습니다.. > 같은 Cell을 키워본건 아니지만, human colon normal cell을 키워보았습니다. (CDD-18Co) 저도 비슷한 경험을 했지만 초기 seeding #를 적게 해보심 어떻까요? 90%에서 1:2면 이미 50% confluent 상태라 잘 안자랄것 같은데요. 이런 cell 들은 density가 높으면 오래 키워도 더 이상 안자랍니다. 암세포가 아니니까. 한 1:4 ~ 1:5 로 split 해서 키워서 60~70% 정도까지만 키워서 쓰시는게 나을거 같네요. (당연히 실험 하실려면 4~5개의 Flask로 만드시는거 아시죠??^^)
    >CCD-986sk이란 cell을 키워보신분 계신가요? >human skin fibroblast cell인데 무지 안자라요.. >세포주은행에 문의하니 normal cell이라 원래 잘 안자란다고 하더군요 >그치만 doubling time이 넘 길어요 >80-90% confluent 상태에서 1:2 split했는데 일주일이 지나도 60%정도밖에 안되는것 같네요... >이 cell을 키워보신분들의 조언을 듣고 싶습니다.. > 같은 Cell을 키워본건 아니지만, human colon normal cell을 키워보았습니다. (CDD-18Co) 저도 비슷한 경험을 했지만 초기 seeding #를 적게 해보심 어떻까요? 90%에서 1:2면 이미 50% confluent 상태라 잘 안자랄것 같은데요. 이런 cell 들은 density가 높으면 오래 키워도 더 이상 안자랍니다. 암세포가 아니니까. 한 1:4 ~ 1:5 로 split 해서 키워서 60~70% 정도까지만 키워서 쓰시는게 나을거 같네요. (당연히 실험 하실려면 4~5개의 Flask로 만드시는거 아시죠??^^)
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    전주홍님의 답변

    혹시 어느 정도 doubling을 한 세포인지요? senescence 현상이 일어나는 것은 아닐까요? 전형적인 fibroblast의 모양이 아니라 세포가 크기가 커지면서 퍼진 형태가 나타나고 핵이 여러개 존재하는 세포가 나타나기 시작하면 senescence로 빠져가기 있는 상태라서 doubling이 잘 안 일어날텐데요.... >CCD-986sk이란 cell을 키워보신분 계신가요? >human skin fibroblast cell인데 무지 안자라요.. >세포주은행에 문의하니 normal cell이라 원래 잘 안자란다고 하더군요 >그치만 doubling time이 넘 길어요 >80-90% confluent 상태에서 1:2 split했는데 일주일이 지나도 60%정도밖에 안되는것 같네요... >이 cell을 키워보신분들의 조언을 듣고 싶습니다.. >
    혹시 어느 정도 doubling을 한 세포인지요? senescence 현상이 일어나는 것은 아닐까요? 전형적인 fibroblast의 모양이 아니라 세포가 크기가 커지면서 퍼진 형태가 나타나고 핵이 여러개 존재하는 세포가 나타나기 시작하면 senescence로 빠져가기 있는 상태라서 doubling이 잘 안 일어날텐데요.... >CCD-986sk이란 cell을 키워보신분 계신가요? >human skin fibroblast cell인데 무지 안자라요.. >세포주은행에 문의하니 normal cell이라 원래 잘 안자란다고 하더군요 >그치만 doubling time이 넘 길어요 >80-90% confluent 상태에서 1:2 split했는데 일주일이 지나도 60%정도밖에 안되는것 같네요... >이 cell을 키워보신분들의 조언을 듣고 싶습니다.. >
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    홍동호님의 답변

    >CCD-986sk이란 cell을 키워보신분 계신가요? >human skin fibroblast cell인데 무지 안자라요.. >세포주은행에 문의하니 normal cell이라 원래 잘 안자란다고 하더군요 >그치만 doubling time이 넘 길어요 >80-90% confluent 상태에서 1:2 split했는데 일주일이 지나도 60%정도밖에 안되는것 같네요... >이 cell을 키워보신분들의 조언을 듣고 싶습니다.. > 여러가지 세포주를 사용해 보았는데, FBS의 농도를 높이면서 사용하면 세포의 상태도 좋아지고 좋아지면 원래의 농도대로 하면 좋을 듯 합니다. 세포confluency는 70% 정도 유지하면서 일주일에 1-2번 정도를 하시면 됩니다. 물론 세포의 상태 는 매일 관찰하면서 하시면 됩니다.
    >CCD-986sk이란 cell을 키워보신분 계신가요? >human skin fibroblast cell인데 무지 안자라요.. >세포주은행에 문의하니 normal cell이라 원래 잘 안자란다고 하더군요 >그치만 doubling time이 넘 길어요 >80-90% confluent 상태에서 1:2 split했는데 일주일이 지나도 60%정도밖에 안되는것 같네요... >이 cell을 키워보신분들의 조언을 듣고 싶습니다.. > 여러가지 세포주를 사용해 보았는데, FBS의 농도를 높이면서 사용하면 세포의 상태도 좋아지고 좋아지면 원래의 농도대로 하면 좋을 듯 합니다. 세포confluency는 70% 정도 유지하면서 일주일에 1-2번 정도를 하시면 됩니다. 물론 세포의 상태 는 매일 관찰하면서 하시면 됩니다.
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