2006-09-11
org.kosen.entty.User@2c59be8b
유성재(beatmax)
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cell culture 를 위한 칼슘이 들어가지 않은 배지를 만들려고 합니다.
칼슘 농도는 나중에 따로 조절을 하려고 하구요.
칼슘이 들어가지 않은 media가 invitrogen에서 나온것 중에 3가지가 있는데요...
배지로 쓰기위해 media에 FBS를 첨가해 주면 FBS에도 칼슘이 어느정도 들어있기 때문에...
결국 칼슘이 들어가지 않은 배지를 만들려면,
ca-free media + ca-free FBS를 사용해야 되는 것으로 알고 있습니다.
칼슘 성분이 들어있지 않은 media는 알고 있지만,
혹시 FBS도 칼슘 성분이 들어있지 않은 제품이 있는지 궁금합니다.
그리고 가능하다면 일반 배지 혹은 media에서 칼슘을 없애는 어떤 reagent나 시약이 있는지,
방법은 무엇인지도 알려주시면 감사하겠습니다.
마지막으로...!
쫌 어려운 질문이지만...
cell culture를 위해서 ca-free media를 사용한 논문이 있는지도 알려주세요~ㅜㅜ
이중 한가지만이라도...
답변 부탁드립니다...ㅜㅜ
- calcium
- free
- ca-free
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 3
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답변
변해미님의 답변
2006-09-11- 0
저도 석사과정때 Ca2+ free 배지를 사용했었습니다. 이 배지같은 경우는 FBS를 넣지 않습니다. 500ml bottle로 solution medium과 1ml vial에 serum extract가 kit로 제공되는 배지를 사용했었습니다. 물론 세포에 따라 사용할 수 있는 배지는 달라지겠지요. 저는 피부세포의 한 종류인 keratinocyte를 배양했었고, 이 세포의 경우는 외부 calcium 의 농도에 따라 분화가 되기 때문에 처음에 배양을 시작할 때는 Calcium free media를 사용했었습니다. Clontech과 Invtrogen제품을 사용했었습니다. 그리고 외부 칼슘만 제거해주고 싶으시다면 1M EDTA를 준비해서 농도를 맞추서 adding하셔 사용하셔도 될것 같은데요. -
답변
홍동호님의 답변
2006-09-11- 0
>cell culture 를 위한 칼슘이 들어가지 않은 배지를 만들려고 합니다. >칼슘 농도는 나중에 따로 조절을 하려고 하구요. > >칼슘이 들어가지 않은 media가 invitrogen에서 나온것 중에 3가지가 있는데요... >배지로 쓰기위해 media에 FBS를 첨가해 주면 FBS에도 칼슘이 어느정도 들어있기 때문에... >결국 칼슘이 들어가지 않은 배지를 만들려면, >ca-free media + ca-free FBS를 사용해야 되는 것으로 알고 있습니다. > >칼슘 성분이 들어있지 않은 media는 알고 있지만, >혹시 FBS도 칼슘 성분이 들어있지 않은 제품이 있는지 궁금합니다. > >그리고 가능하다면 일반 배지 혹은 media에서 칼슘을 없애는 어떤 reagent나 시약이 있는지, >방법은 무엇인지도 알려주시면 감사하겠습니다. > >마지막으로...! >쫌 어려운 질문이지만... >cell culture를 위해서 ca-free media를 사용한 논문이 있는지도 알려주세요~ㅜㅜ > >이중 한가지만이라도... >답변 부탁드립니다...ㅜㅜ > GibCo BRL에서 배양액을 찾아 보세요. Ca2+, Mg2+ free HBSS 배양액을 팔고 있습니다. 팔고 있는 대리점은 케이디알 에서 팔고 있습니다. -
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전주홍님의 답변
2006-09-11- 0
Serum의 경우 dialyzed serum을 판매하는데 조금 비싼 편이고 완벽하게 calcium없다고 말하기 힘들기 때문에 EGTA로 chelation 시키는 protocol을 많이 사용합니다. 실험목적에 따라 특히 전기생리학 실험일 경우 단시간내에 칼슘 유입을 측정하기 때문에 상당히 고농도의 EGTA를 처리하기도 합니다.