2006-11-06
org.kosen.entty.User@35dcc01d
임채진(kwcl)
- 0
회사들에서 만들어파는 competitive elisa kit을 사용해보면 plasma나 serum을 가지고 펩타이드 농도 측정하더라도 background가 거의 없이 나옵니다.
그런데 너무 비싸서 kit을 만들어 사용하고자 polyclonal Ab를 만들어 사용해보면 background가 높게 나오고 blank serum에 spiking해도 계산된 값과 동일하게 나오지않네요.
1. compeptitive elisa kit들에서 capture Ab등을 coating할때 일반적인 maxisorp과 같은 plate를 사용하지않고 covalent linking시켜주는 covalink 등의 plate를 사용하나요?
2. 저는 washing시 PBS-T(0.05%), blocking시 PBS-T,BSA(0.5%)를 사용하고 있는데 좀 더 특화된 buffer를(회사별로 optimization된 것들) 사용하나요?
3. 저는 분자량 5000가량 되는 target 펩타이드를 10ng/ml에서 30pg/ml까지의 범위 내에서 detection해야 합니다. 그렇다면 competitive partner로 biotin labeling된 펩타이드 및 HRP conjugate, capture Ab를 어느 농도로 사용하는게 좋을까요?
이와 더불어 펩타이드에 대한 competitive elisa를 수행할 때 유의해야 할 사항이있다면 조언 부탁드리겠습니다.
- ELISA
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 0