KOSEN 한인과학기술자네트워크

닫기

더 많은 혜택을 위해
로그인 하세요.

지식나눔

지식나눔

biotin이 결합된 항체는 어떻게 만들어지나요?

2006-12-01 org.kosen.entty.User@2cc88e84 박정현(jay2072)
  • 2
비오틴이 결합된 항체를 만들어서 판다고 하는데, Fab부분에 결합이 되어있으면, 문제가 있을거같은데, Fc부분에 결합이 되어있는건가요? 그럼, 어떤식으로 Fc부분에만 결합하는지 궁굼합니다. 무작위적으로 해서 Fc부분에만 붙는 걸 screening등으로 골라내는지 그런 방법을 자세히 알려면 어디서 볼 수 있는지.. 항체에 비오틴을 결합시킬수 있다면, 어떤 프로틴에 아비딘을 결합시킬수도 있는건가요? 아비딘이나 비오틴으로 코팅한다함은, 프로틴 전체를 둘러싸 코팅되는 것 인지 궁굼합니다. 그럼, 아비딘이 결합된 프로틴에 비오틴이 결합된 항체를 아비딘-비오틴 의 높은 어피니티로 서로 conjugate시킬 수 있을까요?
  • biotin
  • avidin
  • antibody
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변하기
답변 2
  • 답변

    이호진님의 답변

    2006-12-02
    • 0
    어디서 바이오틴-결합된 항체를 만드는지는 잘모르겠지만, 질문 부분과 유사한 논문을 찾아보았습니다. biotin-conjugated protein Fab라는 키워드를 찾은 결과입니다. “Automated Kinetic Exclusion Assays to Quantify Protein Binding Interactions in Homogeneous Solution“ Robert C. Blake, II a, 1, Andrey R. Pavlovb and Diane A. Blakeb http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6W9V-45HR6MN-59&_coverDate=08%2F01%2F1999&_alid=499995278&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_qd=1&_cdi=6692&_sort=d&view=c&_acct=C000050221&_version=1&_urlVersion=0&_userid=10&md5=afbb3c64dd70e9e823bf31344d449948 단백질에 형광 물질이나 바이오틴을 결합 시키는 경우가 있는데, 화학 방법이 이용됩니다. 형광물질이나 바이오틴은 연결시키려는 아미노산을 Cys으로 변형시킨다음 간단한 화학 방법을 이용해 이들 물질을 결합시킬 수 있습니다. 화학 반응은 간단하지만.. 반응 도중 단백질을 잃을 수 있습니다. 바이오틴과 아비딘은 결합상수가 피코몰(pM)인가로 매우 강한 결합입니다. 정확한 숫자는 인터넷으로 찾으실 수 있습니다. 바이오틴이나 아비딘은 단백질-단백질 상호작용을 연구할 때 사용합니다. 바이오틴이나 아비딘을 이용한 연구는 FRET이라는 키워드로 찾으시면 찾으실 수 있을 겁니다. 아마도.. http://www.pnas.org/cgi/reprint/261567298v1.pdf 그리고 관련 제품을 파는 회사도 있습니다. 예전에 해서 기억은 나지 않습니다. 인터넷으로 찾으실 수 있을 겁니다. 그럼. >비오틴이 결합된 항체를 만들어서 판다고 하는데, > >Fab부분에 결합이 되어있으면, 문제가 있을거같은데, > >Fc부분에 결합이 되어있는건가요? > >그럼, 어떤식으로 Fc부분에만 결합하는지 궁굼합니다. > >무작위적으로 해서 Fc부분에만 붙는 걸 screening등으로 골라내는지 > >그런 방법을 자세히 알려면 어디서 볼 수 있는지.. > >항체에 비오틴을 결합시킬수 있다면, > >어떤 프로틴에 아비딘을 결합시킬수도 있는건가요? > >아비딘이나 비오틴으로 코팅한다함은, 프로틴 전체를 둘러싸 코팅되는 것 > >인지 궁굼합니다. > >그럼, 아비딘이 결합된 프로틴에 비오틴이 결합된 항체를 아비딘-비오틴 > >의 높은 어피니티로 서로 conjugate시킬 수 있을까요?
    답변수정
    어디서 바이오틴-결합된 항체를 만드는지는 잘모르겠지만, 질문 부분과 유사한 논문을 찾아보았습니다. biotin-conjugated protein Fab라는 키워드를 찾은 결과입니다. “Automated Kinetic Exclusion Assays to Quantify Protein Binding Interactions in Homogeneous Solution“ Robert C. Blake, II a, 1, Andrey R. Pavlovb and Diane A. Blakeb http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6W9V-45HR6MN-59&_coverDate=08%2F01%2F1999&_alid=499995278&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_qd=1&_cdi=6692&_sort=d&view=c&_acct=C000050221&_version=1&_urlVersion=0&_userid=10&md5=afbb3c64dd70e9e823bf31344d449948 단백질에 형광 물질이나 바이오틴을 결합 시키는 경우가 있는데, 화학 방법이 이용됩니다. 형광물질이나 바이오틴은 연결시키려는 아미노산을 Cys으로 변형시킨다음 간단한 화학 방법을 이용해 이들 물질을 결합시킬 수 있습니다. 화학 반응은 간단하지만.. 반응 도중 단백질을 잃을 수 있습니다. 바이오틴과 아비딘은 결합상수가 피코몰(pM)인가로 매우 강한 결합입니다. 정확한 숫자는 인터넷으로 찾으실 수 있습니다. 바이오틴이나 아비딘은 단백질-단백질 상호작용을 연구할 때 사용합니다. 바이오틴이나 아비딘을 이용한 연구는 FRET이라는 키워드로 찾으시면 찾으실 수 있을 겁니다. 아마도.. http://www.pnas.org/cgi/reprint/261567298v1.pdf 그리고 관련 제품을 파는 회사도 있습니다. 예전에 해서 기억은 나지 않습니다. 인터넷으로 찾으실 수 있을 겁니다. 그럼. >비오틴이 결합된 항체를 만들어서 판다고 하는데, > >Fab부분에 결합이 되어있으면, 문제가 있을거같은데, > >Fc부분에 결합이 되어있는건가요? > >그럼, 어떤식으로 Fc부분에만 결합하는지 궁굼합니다. > >무작위적으로 해서 Fc부분에만 붙는 걸 screening등으로 골라내는지 > >그런 방법을 자세히 알려면 어디서 볼 수 있는지.. > >항체에 비오틴을 결합시킬수 있다면, > >어떤 프로틴에 아비딘을 결합시킬수도 있는건가요? > >아비딘이나 비오틴으로 코팅한다함은, 프로틴 전체를 둘러싸 코팅되는 것 > >인지 궁굼합니다. > >그럼, 아비딘이 결합된 프로틴에 비오틴이 결합된 항체를 아비딘-비오틴 > >의 높은 어피니티로 서로 conjugate시킬 수 있을까요?
    등록된 댓글이 없습니다.
  • 답변

    김동현님의 답변

    2006-12-07
    • 0
    www.piercenert.com에서 확인가능합니다. PIERCE 제품이고 CAT#는 20217입니다. 제품명은 EZ-Link NHC-biotin입니다. 유사제품이 많으니 확인하시고 적합한 것으로 선택하시면 될 것 같습니다. biotin으로 labeling된 항체를 detection함에 있어 avidin에 결합된 dye나 enzyme을 일반적으로 사용하는 것으로 보아 avidin이 결합된 protein에 biotin이 결합된 항체를 avidin-biotin의 높은 affinity로 서로 conjugate시키는 것은 별 무리가 없을 것 같습니다. >비오틴이 결합된 항체를 만들어서 판다고 하는데, > >Fab부분에 결합이 되어있으면, 문제가 있을거같은데, > >Fc부분에 결합이 되어있는건가요? > >그럼, 어떤식으로 Fc부분에만 결합하는지 궁굼합니다. > >무작위적으로 해서 Fc부분에만 붙는 걸 screening등으로 골라내는지 > >그런 방법을 자세히 알려면 어디서 볼 수 있는지.. > >항체에 비오틴을 결합시킬수 있다면, > >어떤 프로틴에 아비딘을 결합시킬수도 있는건가요? > >아비딘이나 비오틴으로 코팅한다함은, 프로틴 전체를 둘러싸 코팅되는 것 > >인지 궁굼합니다. > >그럼, 아비딘이 결합된 프로틴에 비오틴이 결합된 항체를 아비딘-비오틴 > >의 높은 어피니티로 서로 conjugate시킬 수 있을까요?
    답변수정
    www.piercenert.com에서 확인가능합니다. PIERCE 제품이고 CAT#는 20217입니다. 제품명은 EZ-Link NHC-biotin입니다. 유사제품이 많으니 확인하시고 적합한 것으로 선택하시면 될 것 같습니다. biotin으로 labeling된 항체를 detection함에 있어 avidin에 결합된 dye나 enzyme을 일반적으로 사용하는 것으로 보아 avidin이 결합된 protein에 biotin이 결합된 항체를 avidin-biotin의 높은 affinity로 서로 conjugate시키는 것은 별 무리가 없을 것 같습니다. >비오틴이 결합된 항체를 만들어서 판다고 하는데, > >Fab부분에 결합이 되어있으면, 문제가 있을거같은데, > >Fc부분에 결합이 되어있는건가요? > >그럼, 어떤식으로 Fc부분에만 결합하는지 궁굼합니다. > >무작위적으로 해서 Fc부분에만 붙는 걸 screening등으로 골라내는지 > >그런 방법을 자세히 알려면 어디서 볼 수 있는지.. > >항체에 비오틴을 결합시킬수 있다면, > >어떤 프로틴에 아비딘을 결합시킬수도 있는건가요? > >아비딘이나 비오틴으로 코팅한다함은, 프로틴 전체를 둘러싸 코팅되는 것 > >인지 궁굼합니다. > >그럼, 아비딘이 결합된 프로틴에 비오틴이 결합된 항체를 아비딘-비오틴 > >의 높은 어피니티로 서로 conjugate시킬 수 있을까요?
    등록된 댓글이 없습니다.
목록
목록