지식나눔

균주 개량 방법 부탁드립니다.

이번에 균주를 연구를 시작하게 되었습니다. 이 균주가 생산하는 물질은 대사 경로 중 pyruvate가 많으면 물질 생산이 많이 된다고 합니다. 균체 내에 pyruvate 생산을 많이 하거나 TCA 사이클 중 하나의 경로를 blocking 시 키면 pyruvate가 축적되어 물질 생산이 많이 되지 않을 가 합니다. 혹시 이와 관련된 논문이나 방법 아시는 분 추천 좀 부탁드립니다.
  • 돌연변이
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
  • 답변

    윤재영님의 답변

    넘어야 하겠군요,,, 일단 공부를 많이 하셔야 할 것 같습니다. 많은 경우 텍스트나, 논문을 통하여 접할 수 있는 기초적인 연구 방법입니다. 특별하지 않고, 일반적이라 이야기지요,, 특정한 유전자의 활성을 제거하거나 억제하는 방법은 전통적인 ramdom mutagenesis나 요즘처럼 genome information이 많이 알려져 있을 경우 site direct mutagenesis가 많이 이용됩니다. 그러나 TCA cycle에 관련된 유전자의 경우 그 정보가 많이 알려져 있기에 대상균주의 유전자를 클로닝하고 (염기서열을 모른 다는 전제하에) 염기서열을 밝힌 다음, 요즘 많이 나와있는 site direct mutagenesis kits를 이용하시면 될 것 같습니다. 물론 TCA cycle 중 어느 부분을 억제 (하나 혹은 2개 이상) 해야할지도 관련 논문은 대단이 많으니 찾아서 정리를 해보기 바랍니다. 아마도 석사 초기생이나, 분자 유전학에 대한 공부를 처음 시작한 분 같은데 열심이 하시고, 개괄적인 방법 보다는 실험을 진행하는 도중 부딪히는 실제적인 어려움의 경우 좀 더 좋을 조언을 받을 수 있을 것입니다. 그럼 ,,, 홧팅!
    넘어야 하겠군요,,, 일단 공부를 많이 하셔야 할 것 같습니다. 많은 경우 텍스트나, 논문을 통하여 접할 수 있는 기초적인 연구 방법입니다. 특별하지 않고, 일반적이라 이야기지요,, 특정한 유전자의 활성을 제거하거나 억제하는 방법은 전통적인 ramdom mutagenesis나 요즘처럼 genome information이 많이 알려져 있을 경우 site direct mutagenesis가 많이 이용됩니다. 그러나 TCA cycle에 관련된 유전자의 경우 그 정보가 많이 알려져 있기에 대상균주의 유전자를 클로닝하고 (염기서열을 모른 다는 전제하에) 염기서열을 밝힌 다음, 요즘 많이 나와있는 site direct mutagenesis kits를 이용하시면 될 것 같습니다. 물론 TCA cycle 중 어느 부분을 억제 (하나 혹은 2개 이상) 해야할지도 관련 논문은 대단이 많으니 찾아서 정리를 해보기 바랍니다. 아마도 석사 초기생이나, 분자 유전학에 대한 공부를 처음 시작한 분 같은데 열심이 하시고, 개괄적인 방법 보다는 실험을 진행하는 도중 부딪히는 실제적인 어려움의 경우 좀 더 좋을 조언을 받을 수 있을 것입니다. 그럼 ,,, 홧팅!
    등록된 댓글이 없습니다.