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NF-kB의 핵으로의 이동~급합니다..

Raw 264.7 세포에서 NF-kB의 핵으로의 이동하는 것을 형광으로 관찰하려고 합니다.. LPS는 100ng/ml의 농도로 처리하고 1시간 2시간 배양하는데.. 염색을 해서 관찰을 해보니.......... 핵으로 이동을 하지 않습니다.. 이동하는 것을 관찰할 수가 없네요.. 왜그런거죠?? DAPI로 핵을 염색해 보았는데 핵 모양도 이상합니다.. 찌그러졌다고 해야 하나?? 암튼 그렇습니다.. 왜그런지 도움 좀 주세요.. 급합니다..
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답변 2
  • 답변

    윤철희님의 답변

    LPS 자극에 의한 Myd88-dependent pathway에서 NF-kB의 변화를 보시는 실험을 하시는 것 같은데요.. 시간이 1시간 후면 이미 반응들이 끝나있을 시간일 듯 합니다.. LPS의 양도 물론 영향을 미치기는 하지만.. 좀 더 짧은 시간대에서 확인해 보심이 좋을 듯 합니다.. 0, 5, 10, 20, 60 분에서 시도해보시기 바랍니다.. 이때에도 잡히지 않는다면.. 자세한 설명이 없어서 잘 모르겠지만.. 정확한 이유를 알기 위해서는 세포상태, 실험방법과 reagents를 면밀히 검토해야 할 것 같습니다.. 좋은 실험되세요.. >Raw 264.7 세포에서 NF-kB의 핵으로의 이동하는 것을 형광으로 관찰하려고 합니다.. > >LPS는 100ng/ml의 농도로 처리하고 1시간 2시간 배양하는데.. > >염색을 해서 관찰을 해보니.......... > >핵으로 이동을 하지 않습니다.. 이동하는 것을 관찰할 수가 없네요.. >왜그런거죠?? >DAPI로 핵을 염색해 보았는데 핵 모양도 이상합니다.. >찌그러졌다고 해야 하나?? >암튼 그렇습니다.. > >왜그런지 도움 좀 주세요.. >급합니다..
    LPS 자극에 의한 Myd88-dependent pathway에서 NF-kB의 변화를 보시는 실험을 하시는 것 같은데요.. 시간이 1시간 후면 이미 반응들이 끝나있을 시간일 듯 합니다.. LPS의 양도 물론 영향을 미치기는 하지만.. 좀 더 짧은 시간대에서 확인해 보심이 좋을 듯 합니다.. 0, 5, 10, 20, 60 분에서 시도해보시기 바랍니다.. 이때에도 잡히지 않는다면.. 자세한 설명이 없어서 잘 모르겠지만.. 정확한 이유를 알기 위해서는 세포상태, 실험방법과 reagents를 면밀히 검토해야 할 것 같습니다.. 좋은 실험되세요.. >Raw 264.7 세포에서 NF-kB의 핵으로의 이동하는 것을 형광으로 관찰하려고 합니다.. > >LPS는 100ng/ml의 농도로 처리하고 1시간 2시간 배양하는데.. > >염색을 해서 관찰을 해보니.......... > >핵으로 이동을 하지 않습니다.. 이동하는 것을 관찰할 수가 없네요.. >왜그런거죠?? >DAPI로 핵을 염색해 보았는데 핵 모양도 이상합니다.. >찌그러졌다고 해야 하나?? >암튼 그렇습니다.. > >왜그런지 도움 좀 주세요.. >급합니다..
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    이원하님의 답변

    >Raw 264.7 세포에서 NF-kB의 핵으로의 이동하는 것을 형광으로 관찰하려고 합니다.. > >LPS는 100ng/ml의 농도로 처리하고 1시간 2시간 배양하는데.. > >염색을 해서 관찰을 해보니.......... > >핵으로 이동을 하지 않습니다.. 이동하는 것을 관찰할 수가 없네요.. >왜그런거죠?? >DAPI로 핵을 염색해 보았는데 핵 모양도 이상합니다.. >찌그러졌다고 해야 하나?? >암튼 그렇습니다.. > >왜그런지 도움 좀 주세요.. >급합니다..
    >Raw 264.7 세포에서 NF-kB의 핵으로의 이동하는 것을 형광으로 관찰하려고 합니다.. > >LPS는 100ng/ml의 농도로 처리하고 1시간 2시간 배양하는데.. > >염색을 해서 관찰을 해보니.......... > >핵으로 이동을 하지 않습니다.. 이동하는 것을 관찰할 수가 없네요.. >왜그런거죠?? >DAPI로 핵을 염색해 보았는데 핵 모양도 이상합니다.. >찌그러졌다고 해야 하나?? >암튼 그렇습니다.. > >왜그런지 도움 좀 주세요.. >급합니다..
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