2007-04-14
org.kosen.entty.User@1c681036
구기방(bestlife7)
- 1
저는 생화학을 공부하고 있는 학생입니다.
다름이 아니오라 제한효소가 특정 염기 서열을 어떻게 인식하는지
그리고 절단하는 메커니즘이 궁금해서 여쭤봅니다 ^ ^
주말이라 도서관도 안하고 ㅠ 인터넷에서는 자세히 나온 것이 없는 것 같더라구요 ㅠ
답변부탁드리겠습니다. ^ ^
- restriction enzyme
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
-
답변
김병훈님의 답변
2007-04-16- 0
▶제한 효소(restriction enzyme ) 제한 효소란 특정염기서열에서 DNA분자의 당-인산 골격을 끊을 수 있는 효소를 말한다. 이러한 효소들은 자연상태의 세균에 존재하는데 외부의 DNA가 침투했을 때 없애는 역할을 하는 효소이다. 이 제한 효소는 유전공학에서 매우 광범위하게 이용되고 있다.자연에서의 이 효소들의 역할은 외부에서 침투한 바이러스의 DNA를 절단하는 것이지만 실제로 DNA사슬에존재하는 특정 뉴클레오타이드 서열을 절단할 수 있다. 대부분의 제한효소들은 DNA분자에 있는 짧은 염기서열을 인식하고, 소위 이 인식서열이라고 하는 특정 부위를 자른다. 수백 종류의 제한효소가 존재하며 약 100여 개의 제한효소 인식서열이 알려져 있다. <각 미생물에서 만들어지는 제한효소와 인식되는 DNA서열> 생물체 효소 절단자리가 표시된 DNA서열 Bacillus amyloliquefaciens Bam HI 5`--------G GATCC--------3` 3`--------CCTAG G--------5` Escherichia coli Eco RI 5`--------G AATTC--------3` 3`--------CTTAA G--------5` Haemophilus parainfluenza Hind III 5`--------A AGCTT--------3` 3`--------TTCGA A--------5` Haemophilus parainfluenza Hpa II 5`--------C CGG-----------3` 3`--------GGC C-----------5` Moroxella bovis Mbo I 5`-------- GATC----------3` 3`--------CTAG ----------5` ▶제한효소와 DNA연결효소(DNA ligase)를 이용한 DNA 재조합 → 각각 다른 종의 DNA서열을 같은 제한효소를 사용하여 염기배열을 잘라낸다. 위의 경우 BamHI는 같은 GGATCC염기서열을 자르게 된다. → 잘라진 끝부분은 앞으로 튀어나온 단일 사슬의 DNA로 되어있다. 이것들을 점착성 말단(sticky ends)라고 부른다.왜냐하면 이것들은 상보적인 sticky end 를 가진 어떤 DNA분자와도 결합을 할 수 있기 때문이다. → 각각 다른 두 종의 DNA를 같은 제한효소로 잘랐기 때문에 같은 sticky end를 가지게 된다. → 다른 두 종의 DNA를 섞어주게 되면 sticky end가 붙게된다. → sticky end들의 결합은 몇 개의 수소결합만으로 연결되어 있으므로 일시적이지만, DNA 연결효소(DNA ligase)에 의해 영구적으로 결합될 수 있다