2007-05-01
org.kosen.entty.User@41ae40e0
윤지현(keres)
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논문을 읽다보니 field inversion gel electrophoresis(FIGE)에 대한 실험이 나오더라구요.
이것에 대한 원리 및 실험방법 등에 대해 자세히 알려주세요~~~~^^
- FIGE
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답변
김병훈님의 답변
2007-05-01- 0
전기영동의 개념은 아실것이고.. 먼저 FIGE (Field Inversion Gel Electrophoresis)는 우리말로 '역전장 전기 영동장치'라고 하는데. Gel에 주어지는 전기장의 각도가 한 방향으로 고정되어 있고 이 방향을 invert하게 앞 뒤로 바꿔 줄 수 있어서, 250kb까지의 sample size 범위에서 빠른 시간 내에 실험 결과를 얻을 수 있다고 합니다. 아래는 관련 내용이니깐 읽어보시면 더 쉽게 이해되실것같네요.. **Pulse Field Gel Electrophoresis(PFGE)** 1) 장시간전기영동 2) 전기장을 2개이상걸어줌 - 일정한시간동안한방향으로걸어준후 - 다른방향으로한번더전기장을걸어줌 DNA가방향을바꾸면서이동하면서여러요소가관여, 따라서두 size를구분하는여러요소를가산하여준다 Orthogonal Field Alternation gel electrophoresis (OFAGE)-PFGF의일종으로두전기장의방향이직각이되도록걸어준다. 이와관련된방법으로는 Contour clamped homogeneous electric fields(CHEF)나 field inversion gel electrophoresis(FIGE) 방법들이있다. 이들 방법들을 통해우리는각각의 chromosome을분리할수있고, 또한이를 library로만들수도있다. 또한각각의 chromosomal gene library는 complete genomic library에비해다루기가쉽다. 게다가이 chromosomal DNA molecule을 southern hybridization 가능하여이염색체가가진 genes들을확인할 수 있다. ** 전기 영동 도중, 가해지는 전장의 방향을 변화시킴으로서 DNA 분자를 재배열시켜 아가로오스 매트릭스를 통과할 수 있도록 하는 방법. 거대 분자량의 DNA 분리를 위해 사용된다. 일반적인 전기 영동 방법은 30 kbp 이상의 크기에는 사용될 수 없으나,PFGE는 200~3000 kbp에 이르는 큰 분자의 DNA 분리에 적용될 쇼수 있다. 이를 활용한 장치는 디자인에 따라 traverse alternating field electrophoresis (TAFE), field inversion gel electrophoresis (FIGE), rotating gel 및 controur-clamped homogeneous electric field (CHEF) 등으로 구분된다