지식나눔

NF-KB 형광염색시 DAPI염색이유?

LPS를 처리하여 NF-kB의 이동을 형광염색하여 확인하는 실험에서 왜 DAPI를 염색하는 거죠?? 왜 DAPI를 써서 염색을 하는지요?? 그리고 그것이 무엇을 의미하는지요?? 도움 좀 주세요~ ㅠ
  • DAPI
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답변 1
  • 답변

    진언호님의 답변

    간단히...NF-kB는 transcription factor로써 cytosol 내 존재하다가 activation (phosphorylation 등으로) 되면 핵 내로 이동하여 주로 세포 생장에 관여하는 유전자의 promoter에 결합하여 전사를 촉진합니다. 따라서 LPS 처리 전에는 주로 cytosol 내에서 형광이 관찰되며 LPS를 처리하면 cytosol 형광은 약해지고 반대로 핵은 형광이 더 강해집니다. DAPI는 핵을 혐색하는 대표적인 형광 (Blue) 물질이죠. 핵의 위치를 정확히 확인하고 그 핵의 NF-kB 형광 (보통 green) 정도를 비교하기 위해 사용하죠. 한마디로 더 진해진 부위가 핵이란 걸 확신하기 위해 사용합니다. >LPS를 처리하여 NF-kB의 이동을 형광염색하여 확인하는 실험에서 왜 DAPI를 염색하는 거죠?? >왜 DAPI를 써서 염색을 하는지요?? >그리고 그것이 무엇을 의미하는지요?? > >도움 좀 주세요~ ㅠ >
    간단히...NF-kB는 transcription factor로써 cytosol 내 존재하다가 activation (phosphorylation 등으로) 되면 핵 내로 이동하여 주로 세포 생장에 관여하는 유전자의 promoter에 결합하여 전사를 촉진합니다. 따라서 LPS 처리 전에는 주로 cytosol 내에서 형광이 관찰되며 LPS를 처리하면 cytosol 형광은 약해지고 반대로 핵은 형광이 더 강해집니다. DAPI는 핵을 혐색하는 대표적인 형광 (Blue) 물질이죠. 핵의 위치를 정확히 확인하고 그 핵의 NF-kB 형광 (보통 green) 정도를 비교하기 위해 사용하죠. 한마디로 더 진해진 부위가 핵이란 걸 확신하기 위해 사용합니다. >LPS를 처리하여 NF-kB의 이동을 형광염색하여 확인하는 실험에서 왜 DAPI를 염색하는 거죠?? >왜 DAPI를 써서 염색을 하는지요?? >그리고 그것이 무엇을 의미하는지요?? > >도움 좀 주세요~ ㅠ >
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