지식나눔

blocking buffer 사용할 때요~

blocking할 때 일반적으로 BSA와 skim milk를 사용하잖아요... abcam Ab를 사용할 때는 어떤 것을 많이 쓰시는지요? santacruz Ab를 사용할 때는 어떤 것을 많이 쓰는지 알고 싶습니다. 그리고 blocking후에 1,2차 Ab붙일 때 BSA가 좋은지, skim milk가 좋은지 알려주세요...
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답변 2
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    이상열님의 답변

    >blocking할 때 일반적으로 BSA와 skim milk를 사용하잖아요... > >abcam Ab를 사용할 때는 어떤 것을 많이 쓰시는지요? > >santacruz Ab를 사용할 때는 어떤 것을 많이 쓰는지 알고 싶습니다. > >그리고 blocking후에 1,2차 Ab붙일 때 BSA가 좋은지, skim milk가 좋은지 알려주세요... > 일반적으로 abcam Ab나 santacruz Ab는 자체의 blocking solution을 만들어서 판매하는 것으로 알려져 있습니다. 따라서 그걸 사서 사용하는 것이 제일 유리합니다. 그리고 Santacruz Ab는 잘 잡히는 Ab는 잘 되고 안잡히는 Ab는 안되는 경향이 있습니다. 따라서 제 생각에는 abcam Ab를 사용하는 것이 상당히 유리하리라 생각됩니다. 그리고 Skim milk는 blocking은 잘 되는데 background가 많이 나타나는 것으로 알려져 있으며 BSA는 그 반대로 나타나는 경우가 많습니다. 이점 참고하시고 하시기 바라며 저는 개인 적인로 skim milk를 선호하고 1, 2차 Ab붙일때 모두 skim milk를 사용합니다. 그럼 수고하세요...
    >blocking할 때 일반적으로 BSA와 skim milk를 사용하잖아요... > >abcam Ab를 사용할 때는 어떤 것을 많이 쓰시는지요? > >santacruz Ab를 사용할 때는 어떤 것을 많이 쓰는지 알고 싶습니다. > >그리고 blocking후에 1,2차 Ab붙일 때 BSA가 좋은지, skim milk가 좋은지 알려주세요... > 일반적으로 abcam Ab나 santacruz Ab는 자체의 blocking solution을 만들어서 판매하는 것으로 알려져 있습니다. 따라서 그걸 사서 사용하는 것이 제일 유리합니다. 그리고 Santacruz Ab는 잘 잡히는 Ab는 잘 되고 안잡히는 Ab는 안되는 경향이 있습니다. 따라서 제 생각에는 abcam Ab를 사용하는 것이 상당히 유리하리라 생각됩니다. 그리고 Skim milk는 blocking은 잘 되는데 background가 많이 나타나는 것으로 알려져 있으며 BSA는 그 반대로 나타나는 경우가 많습니다. 이점 참고하시고 하시기 바라며 저는 개인 적인로 skim milk를 선호하고 1, 2차 Ab붙일때 모두 skim milk를 사용합니다. 그럼 수고하세요...
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    정효균님의 답변

    >blocking할 때 일반적으로 BSA와 skim milk를 사용하잖아요... > >abcam Ab를 사용할 때는 어떤 것을 많이 쓰시는지요? > >santacruz Ab를 사용할 때는 어떤 것을 많이 쓰는지 알고 싶습니다. > >그리고 blocking후에 1,2차 Ab붙일 때 BSA가 좋은지, skim milk가 좋은지 알려주세요... > > 저는 그냥 서울분유에서 나오는 탈지분유를 사용합니다.. 가격도 정말 싸고 skim milk나 BSA 보다 못하다고 할 수없습니다..개인적인 생각 물론 백그라운드가 많으면 그냥 FBS 등으로 blocking을 하기도 합니다.. 산타나 abcam 이나 antibody 특성이 있기 때문에 잘 나오는건 잘 나오지만 않나오는건 또 잘 않나옵니다... 전혀 band가 나오지않는다면 blocking을 살짝만 해보세요.. 시간을 단축하거나 (30분정도) 아님 blocking buffer 농도를 1~3 % 정도로 낮추어 사용하는것도 추천해 드리고 싶습니다..
    >blocking할 때 일반적으로 BSA와 skim milk를 사용하잖아요... > >abcam Ab를 사용할 때는 어떤 것을 많이 쓰시는지요? > >santacruz Ab를 사용할 때는 어떤 것을 많이 쓰는지 알고 싶습니다. > >그리고 blocking후에 1,2차 Ab붙일 때 BSA가 좋은지, skim milk가 좋은지 알려주세요... > > 저는 그냥 서울분유에서 나오는 탈지분유를 사용합니다.. 가격도 정말 싸고 skim milk나 BSA 보다 못하다고 할 수없습니다..개인적인 생각 물론 백그라운드가 많으면 그냥 FBS 등으로 blocking을 하기도 합니다.. 산타나 abcam 이나 antibody 특성이 있기 때문에 잘 나오는건 잘 나오지만 않나오는건 또 잘 않나옵니다... 전혀 band가 나오지않는다면 blocking을 살짝만 해보세요.. 시간을 단축하거나 (30분정도) 아님 blocking buffer 농도를 1~3 % 정도로 낮추어 사용하는것도 추천해 드리고 싶습니다..
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