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지식나눔

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SNU601 을 키우고 있습니다.

2007-07-18 org.kosen.entty.User@722c4813 정소영(iamlina)
  • 3
SNU601 을 키우고 있습니다. 위암세포주구요 이 셀을 이용해서 stable cell line 을 만들려고하는데 우선 G418농도를 정하고 있습니다. 그런데 G418농도를 정하는게 쉽지가 않아요;;; 적당한 농도를 찾아다 싶어서 그 농도를 쳐서 키우다보면 일주일동안은 계속 살다가 갑자기 다 죽어버리네요;;; 제가 농도를 잘못 정한걸까요? 혹시 SNU601셀의 G418농도를 알고 계시거나, stable cell line만들때 tip같은거... 충고 좀 해주세요~ 처음으로 stable cell line만드는 저에게는 큰 힘이 될것같습니다
  • snu601 G418
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답변 3
  • 답변

    조성진님의 답변

    2007-07-19
    • 0
    저는 stock으로 50 mg/ul, 처리농도는 200 ug/ml로 사용하고 있습니다. 워낙, 여러가지 항암제에 sensitive하고 healthy하게 maintaine하기 까다로운 cell이기에 처리농도는 SNU601의 cell 상태가 많이 좌우할 것 같습니다. 도움이 되셨으면 좋겠습니다.^^
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    저는 stock으로 50 mg/ul, 처리농도는 200 ug/ml로 사용하고 있습니다. 워낙, 여러가지 항암제에 sensitive하고 healthy하게 maintaine하기 까다로운 cell이기에 처리농도는 SNU601의 cell 상태가 많이 좌우할 것 같습니다. 도움이 되셨으면 좋겠습니다.^^
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  • 답변

    홍동호님의 답변

    2007-07-19
    • 0

    첨부파일

    조건을 바꿔 보십시요. 논문의 일부를 발취하였고 참고문헌을 첨부합니다. Cell Culture. Most cancer cell lines were obtained from American Type Culture Collection and SNU601 cell line, a stomach cancer cell line was obtained from Korean Cell Line Bank (Seoul, Korea). Hep3B and other cell lines were cultured in -modified Eagle’s medium and in DMEM, supplemented with 10% heat-inactivated FCS, 100 units/ml penicillin, and 100 µg/ml streptomycin in a humidified atmosphere containing 5% CO2 at 37°C. O2/CO2 levels in the incubator (Vision Sci Co., Seoul, Korea) were either 20%/5% (normoxic) or 1%/5% (hypoxic).
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    조건을 바꿔 보십시요. 논문의 일부를 발취하였고 참고문헌을 첨부합니다. Cell Culture. Most cancer cell lines were obtained from American Type Culture Collection and SNU601 cell line, a stomach cancer cell line was obtained from Korean Cell Line Bank (Seoul, Korea). Hep3B and other cell lines were cultured in -modified Eagle’s medium and in DMEM, supplemented with 10% heat-inactivated FCS, 100 units/ml penicillin, and 100 µg/ml streptomycin in a humidified atmosphere containing 5% CO2 at 37°C. O2/CO2 levels in the incubator (Vision Sci Co., Seoul, Korea) were either 20%/5% (normoxic) or 1%/5% (hypoxic).
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    서기원님의 답변

    2007-07-24
    • 0
    혹시 죄송하지만 cell culture를 잘 하시는 편인가요? 저희도 cell culture를 많이 하는 lab중 하나인데요 꽤 오래 실험을 했는데도 가끔 엉뚱한 행동을 하는 동료들이 있담니다.. 물론 모르고 그러는 것이겠지만, 특히 민감한 세포주의 경우에는 cell maintain이 중요한데, 늘상 하는 거고 딱히 크게 어려운게 없기 때문에 대수롭지 않게 생각하는 경우가 많지만 실험하다보면 이부분이 상당히 중요합니다. 만약에 경우 서투르시다면 숙련된 분에게 체크 받아보세요.. 노파심에 드린 말이고 G-418 사용시 세포가 죽거나 상태가 않좋으면 (물론 적정 놓도를 맞추었는 경우에도) G-418 을 간헐적으로 사용을 해보세요. 농도를 너무 낮추면 selection이 안될 가능성이 있기 때문에 1차 selection에는 G-418 포함 media 그리고 2차 selection시는 G-418 free media. 이런식으로 한두번 반복해보심은 어떨지.. 그래서 세포에 조금은 회복과 적응 시간을 주는 것도 하나의 방법으로 생각되는데요. 물론 이방법은 너무 자주 계속해서 쓰시면 안됨니다... 잘못하면 죽어야할 세포가 저항성을 가진 세포로 둔갑할지도 모름니다.
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    혹시 죄송하지만 cell culture를 잘 하시는 편인가요? 저희도 cell culture를 많이 하는 lab중 하나인데요 꽤 오래 실험을 했는데도 가끔 엉뚱한 행동을 하는 동료들이 있담니다.. 물론 모르고 그러는 것이겠지만, 특히 민감한 세포주의 경우에는 cell maintain이 중요한데, 늘상 하는 거고 딱히 크게 어려운게 없기 때문에 대수롭지 않게 생각하는 경우가 많지만 실험하다보면 이부분이 상당히 중요합니다. 만약에 경우 서투르시다면 숙련된 분에게 체크 받아보세요.. 노파심에 드린 말이고 G-418 사용시 세포가 죽거나 상태가 않좋으면 (물론 적정 놓도를 맞추었는 경우에도) G-418 을 간헐적으로 사용을 해보세요. 농도를 너무 낮추면 selection이 안될 가능성이 있기 때문에 1차 selection에는 G-418 포함 media 그리고 2차 selection시는 G-418 free media. 이런식으로 한두번 반복해보심은 어떨지.. 그래서 세포에 조금은 회복과 적응 시간을 주는 것도 하나의 방법으로 생각되는데요. 물론 이방법은 너무 자주 계속해서 쓰시면 안됨니다... 잘못하면 죽어야할 세포가 저항성을 가진 세포로 둔갑할지도 모름니다.
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