2007-07-24
org.kosen.entty.User@40715450
김경현(clala1211)
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hepatocyte AML12를 ATCC 에서 분양받았는데요.
생각보다 growth media가 복잡하네요.
DMEM/F-12 1:1 media를 샀구요.
우선 10% FBS와 antibiotics를 넣었습니다.
sigma에서 ITS supplement는 제가 임의로 (sigma책자에 정확하게 어떻게 풀라는 얘기가 없어서...) ITS 의 경우 멸균 QW로 녹여서 500ml당 5ml이 되게 넣어주는 농도로 만들었구요..(사실 잘 녹지 않아서 37도 incubator에서 30분정도 incubation 시켰습니다.)
dexamethasone은 sigma 책자대로 1ml ethanol에 녹여 49ml sterile media (멸균 QW를 사용)하여 50ml로 녹여 20ug/ml이 되게 하여 500ml media에 1ml을 넣도록 하였습니다.
이렇게 해서 지금 cell thawing을 하긴 했는데...
2시간쯤 지났는데 cell이 잘 안붙는것 같기도 하고 그래서...
혹시 제가 지금 한 방법들 중에 supplement를 넣는 방법에 있어서 무언가 잘못된 것이 있는 가 싶어서 여쭤봅니다.
여러분의 많은 조언 꼭~! 부탁드릴께요.
- hepatocyte
- AML12
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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