지식나눔

alkaline phosphatase staining에관하여.....

다름이 아니구요... 제가 이번에osteoblast을 alkaline phosphatase staining을 통하여 확인을하려고 합니다. 그런데 어쩐 키트를 이용해서 염색을 시켜야 할지 몰라서 이렇게 글을 남깁니다. 시그마홈페이지에 들어가보니까... 이 키트가 여러가지 있던데요...ㅡㅡ 어떤걸 이용해서 osteoblast를 확인 할수 있는건가여???? 제가 좀 급해서요....ㅜㅜ 아시는 분이 계시다면 빠른 답변좀 부탁드리겠습니다.
  • pig8278
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답변 1
  • 답변

    장성재님의 답변

    반드시 키트를 사용하실 필요는 없습니다. 우선 인터넷의 검색 사이트나 Pubmed에 접속하셔서 관련 논문이나 자료를 찾으신 후 논문에서 사용한 시약 및 방법을 사용하시는 것이 좋을 듯 싶군요. 단일한 세포를 이용하는 경우와 조직을 직접 이용하는 경우에는 counter staining 등 염색법에 차이가 있으므로 주의를 요합니다. Osteoblast의 대표적인 phenotype marker는 잘 아시다시피 alkaline phosphatase와 osteocalcin입니다. alkaline phosphatase의 염색은 논문에 따라 차이가 있지만, NBT/BCIP (Kirkegard and Perry Laboratories Inc; KPL)을 주로 많이 사용합니다. Sigma의 제품으로는 AS-MX phosphate와 FastBlue가 있습니다. 어떤 것을 사용해도 문제는 없습니다. 관련 논문과 비교해서 본인이 선택하세요. Blotting/Histochemistry Substrates (Sigma) -BCIP/NBT Liquid Substrate System B1911 -BCIP/NBT-Purple Liquid Substate System for Membranes B3679 -BCIP/NBT-Blue Liquid Substate System for Membranes B3804 -SIGMA FASTä BCIP/NBT B5655 -SIGMA FASTä Fast Red TR/Naphthol AS-MX Tablets to prepare 10 ml F4523 -SIGMA FASTä Fast Red TR/Naphthol AS-MX Tablets to prepare 1 ml F4648
    반드시 키트를 사용하실 필요는 없습니다. 우선 인터넷의 검색 사이트나 Pubmed에 접속하셔서 관련 논문이나 자료를 찾으신 후 논문에서 사용한 시약 및 방법을 사용하시는 것이 좋을 듯 싶군요. 단일한 세포를 이용하는 경우와 조직을 직접 이용하는 경우에는 counter staining 등 염색법에 차이가 있으므로 주의를 요합니다. Osteoblast의 대표적인 phenotype marker는 잘 아시다시피 alkaline phosphatase와 osteocalcin입니다. alkaline phosphatase의 염색은 논문에 따라 차이가 있지만, NBT/BCIP (Kirkegard and Perry Laboratories Inc; KPL)을 주로 많이 사용합니다. Sigma의 제품으로는 AS-MX phosphate와 FastBlue가 있습니다. 어떤 것을 사용해도 문제는 없습니다. 관련 논문과 비교해서 본인이 선택하세요. Blotting/Histochemistry Substrates (Sigma) -BCIP/NBT Liquid Substrate System B1911 -BCIP/NBT-Purple Liquid Substate System for Membranes B3679 -BCIP/NBT-Blue Liquid Substate System for Membranes B3804 -SIGMA FASTä BCIP/NBT B5655 -SIGMA FASTä Fast Red TR/Naphthol AS-MX Tablets to prepare 10 ml F4523 -SIGMA FASTä Fast Red TR/Naphthol AS-MX Tablets to prepare 1 ml F4648
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