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confocal image에서 GFP대신 FITC를 쓰는 이유?

세포내 localization 분석시 FITC를 사용하는 이유에 대해서 자세한 설명좀 부탁드립니다.
  • confocal
  • GFP
  • FITC
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답변 4
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    이원구님의 답변

    >세포내 localization 분석시 FITC를 사용하는 이유에 대해서 자세한 설명좀 부탁드립니다. Intracellular localization에 있어 GFP는 아주 많이 사용됩니다. 굳이 응용처를 나누자면 GFP는 주로 Gene expression 및 tracing에 쓰이고, FITC는 Covalent labeling agent로 사용되어집니다. 첨부된 자료를 참조하시고 연구에 도움되시길 바랍니다.
    >세포내 localization 분석시 FITC를 사용하는 이유에 대해서 자세한 설명좀 부탁드립니다. Intracellular localization에 있어 GFP는 아주 많이 사용됩니다. 굳이 응용처를 나누자면 GFP는 주로 Gene expression 및 tracing에 쓰이고, FITC는 Covalent labeling agent로 사용되어집니다. 첨부된 자료를 참조하시고 연구에 도움되시길 바랍니다.
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    장성재님의 답변

    >세포내 localization 분석시 FITC를 사용하는 이유에 대해서 자세한 설명좀 부탁드립니다. 질문이 모호하군요. 어떤 내용이 궁금하신지 쓰신 내용으론 답변이 어렵습니다. GFP, YFP. CFP 등도 단백질의 세포내 localization 연구에 사용합니다만....
    >세포내 localization 분석시 FITC를 사용하는 이유에 대해서 자세한 설명좀 부탁드립니다. 질문이 모호하군요. 어떤 내용이 궁금하신지 쓰신 내용으론 답변이 어렵습니다. GFP, YFP. CFP 등도 단백질의 세포내 localization 연구에 사용합니다만....
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    이지연님의 답변

    저도 질문자님의 질문이 좀 모호하다고 느끼긴 했지만, GFP같은 경우는 발현을 보고자 하는 유전자와의 fusion-construct를 만들어서 transfection을 해서 봐야 하기 때문에 유전자 조작이 필요하고 더 많은 일을 필요로 하지만 staining process등이 필요없으니 artifact없이 목적 단백질이 발현되는것을 볼 수 있겠죠. 반면에 FITC와 같은 fluorophore-labeled antibody를 사용하는 경우에는 세포나 조직의 autofluorescence라든가 antibody의 specificity의 문제가 발생할 수 있지만, 유전자 조작을 하지 않고 그냥 down stream analysis로 발현 여부를 확인할 수 있다는게 장점이 아닐까 생각합니다. >세포내 localization 분석시 FITC를 사용하는 이유에 대해서 자세한 설명 좀 부탁드립니다.
    저도 질문자님의 질문이 좀 모호하다고 느끼긴 했지만, GFP같은 경우는 발현을 보고자 하는 유전자와의 fusion-construct를 만들어서 transfection을 해서 봐야 하기 때문에 유전자 조작이 필요하고 더 많은 일을 필요로 하지만 staining process등이 필요없으니 artifact없이 목적 단백질이 발현되는것을 볼 수 있겠죠. 반면에 FITC와 같은 fluorophore-labeled antibody를 사용하는 경우에는 세포나 조직의 autofluorescence라든가 antibody의 specificity의 문제가 발생할 수 있지만, 유전자 조작을 하지 않고 그냥 down stream analysis로 발현 여부를 확인할 수 있다는게 장점이 아닐까 생각합니다. >세포내 localization 분석시 FITC를 사용하는 이유에 대해서 자세한 설명 좀 부탁드립니다.
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    김유찬님의 답변

    >세포내 localization 분석시 FITC를 사용하는 이유에 대해서 자세한 설명좀 부탁드립니다. GFP는요 단백질이구요. FITC는 protein에 conjugation될 수 있는 dye죠. 따라서 사용 방법 목적에 따라 달라집니다. 굳이 구분하자면 말입니다.
    >세포내 localization 분석시 FITC를 사용하는 이유에 대해서 자세한 설명좀 부탁드립니다. GFP는요 단백질이구요. FITC는 protein에 conjugation될 수 있는 dye죠. 따라서 사용 방법 목적에 따라 달라집니다. 굳이 구분하자면 말입니다.
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