2007-09-20
org.kosen.entty.User@5c70adb6
선종흠(humi09)
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fibroblast cell 배양을 하려고 하는데 궁금한 것이 있어서 질문 드립니다.
fibroblast cell 이 자라는게 좀 느려서 FBS 의 농도를 5% 정도 올려서
15% FBS DMEM 에 배양을 해보려고 하는데 세포에 나쁜 영향은 없겟죠??
실험을 빨리 해야 되는데 셀이 좀 느리게 자라는 것이라서..
실험은 콜라겐 생성 시험, 콜라게나아제 억제 시험 하려고 합니다.
FBS 의 농도를 조금 높이면 조금 빨리 자라지 않을까 해서요.ㅎ
fibroblast cell ( CCD-986sk p - 12, Detroit 551 p - 12+10 )
한국세포주은행 에서 분양 받아서 지금은 질소탱크에 보관 중입니다.
- fibroblast cell
- FBS
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답변 2
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답변
장성재님의 답변
2007-09-20- 0
각각의 세포주에 대한 정보는 아래의 ATCC 홈페이지를 통해 정보를 확인하실 수 있습니다. CCD-986SK http://www.atcc.org/common/catalog/numSearch/numResults.cfm?atccNum=CRL-1947 Detroit 551 http://www.atcc.org/common/catalog/numSearch/numResults.cfm?atccNum=CCL-110 두 세포 모두 passage number가 많아질수록 growth가 좋지 않은 것으로 나와 있군요. 계대 배양 하실 때도 비교적 높은 세포 농도에서 계대 배양 하시는 것이 좋을 듯 싶습니다. Master cell banking과 Working cell banking을 구분하여 cell을 stock하시는 것을 권장합니다. Detroit 551의 경우 cell growth가 좋지 않을 때 TNF-alpha를 첨가하면 성장이 향상된다고 나와 있습니다. 실험에 지장이 없으시다면 15%로 혈청 농도를 증가시켜도 무방하겠지만...하시는 실험에 영향을 줄 수 있다면 피하시는 것이 좋습니다. -
답변
인창훈님의 답변
2007-09-21- 0
>fibroblast cell 배양을 하려고 하는데 궁금한 것이 있어서 질문 드립니다. > > fibroblast cell 이 자라는게 좀 느려서 FBS 의 농도를 5% 정도 올려서 > > 15% FBS DMEM 에 배양을 해보려고 하는데 세포에 나쁜 영향은 없겟죠?? > > 실험을 빨리 해야 되는데 셀이 좀 느리게 자라는 것이라서.. > > 실험은 콜라겐 생성 시험, 콜라게나아제 억제 시험 하려고 합니다. > > FBS 의 농도를 조금 높이면 조금 빨리 자라지 않을까 해서요.ㅎ > > fibroblast cell ( CCD-986sk p - 12, Detroit 551 p - 12+10 ) > > 한국세포주은행 에서 분양 받아서 지금은 질소탱크에 보관 중입니다. 보통은 5% FBS를 사용하기는 합니다만.. 셀이 좀 느리게 자라신다면 FBS를 높이시는것 보다는 계대를 빨리해 주시는게 차라리 나으리라 봅니다. 셀수를 불리기 위해 트립신처리후 flask에 옮기는데 FLask에 덜 자랐더라도 한번더 빨리 해주시면 셀의 증식속도가 좀 늘어납니다. 어떤 용도로 fibroblast cell을 사용하시는지는 모르지만 약물을 친다고나 할때 FBS와 반응하는 약물들이 있으니 FBS의 농도를 높이는 것을 그리 추천하지는 않습니다. 윗분 말씀대로 대부분의 cell이 계대를 할수록 초기성질을 잃어버립니다. 암세포가 아닌이상... 보통 10계대 내로 사용하게 되는데 fibroblast cell은 당연히 여기 해당하는 세포입니다.