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지식나눔

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식물 유전자를 S.cerevisie의 chromosom에 integration하는 방법

2007-10-30 org.kosen.entty.User@4a18db0e 이지혜(wisdomgirl)
  • 1
안녕하세요 bio 석사 과정에 있는 학생인데요... 식물에서 분리해낸 유전자를 yeast에 Transfomation하는 것까지는 했는데요... 이 유전자를 Yeast chromosom에 집어 넣어야 한다고 하네요.. 그럼 다른 Vektor를 사용해야 할것은 같은데.. 이 분리해놓은 유전자의 크기는 대략 3,5kb이구요... 제발좀 도와 주세요....
  • Chromosomale Integration
  • S.cerevisiae
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답변 1
  • 답변

    장성재님의 답변

    2007-10-30
    • 0
    '식물에서 분리해낸 유전자를 yeast에 Transfomation하는 것까지는 했다'라고 하셨는데, 어떤 vector를 이용하셔서 cloning과 selection, 그리고 amplification을 하셨는지요? 물론 E.coli에서 하셨을 것으로 생각됩니다만.... 분자 생물학 교과서에 보시면 아주 간단한 예가 나와있을 텐데요. 한번 더 교과서를 자세히 보시길 바랍니다. 주로 E.coli에서 cloning, selection, amplify를 모두 한 후 yeast에 transformation시켜서 eukaryotic proteins의 expression에 사용하는 shuttle vector라고하는 걸 이용할 겁니다. 카달로그만 찾아 보셔도 상업화된 많은 벡터들이 있을 겁니다. 교과서에 나온 건 아마도 YEp13이란 shuttle vector일 겁니다. homologous recombination에 의해 chromosome 내로 integration 되죠. 기타 여러 가지 integration vector도 교과서에 소개되어 있던 걸로 기억합니다. 아래 사이트에 가셔서 다시 한번 복습해 보심이 어떠실지.... http://www.nonoil.com/bio/engineering/chapt7.htm
    답변수정
    '식물에서 분리해낸 유전자를 yeast에 Transfomation하는 것까지는 했다'라고 하셨는데, 어떤 vector를 이용하셔서 cloning과 selection, 그리고 amplification을 하셨는지요? 물론 E.coli에서 하셨을 것으로 생각됩니다만.... 분자 생물학 교과서에 보시면 아주 간단한 예가 나와있을 텐데요. 한번 더 교과서를 자세히 보시길 바랍니다. 주로 E.coli에서 cloning, selection, amplify를 모두 한 후 yeast에 transformation시켜서 eukaryotic proteins의 expression에 사용하는 shuttle vector라고하는 걸 이용할 겁니다. 카달로그만 찾아 보셔도 상업화된 많은 벡터들이 있을 겁니다. 교과서에 나온 건 아마도 YEp13이란 shuttle vector일 겁니다. homologous recombination에 의해 chromosome 내로 integration 되죠. 기타 여러 가지 integration vector도 교과서에 소개되어 있던 걸로 기억합니다. 아래 사이트에 가셔서 다시 한번 복습해 보심이 어떠실지.... http://www.nonoil.com/bio/engineering/chapt7.htm
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