2007-10-31
org.kosen.entty.User@6409adc9
신동호(frog21c)
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얼마전 Molecular probe에서 제공하는 fluorescent microsphere를 구입했습니다.
구입한 microsphere의 설명서에는 표면에 기능기로 Aldehyde sulfate가 있고 이 표면에 항체를 붙이기 위한 프로토콜이 상세하게 설명되어 있었습니다.
이 제품을 구입하면서 관련된 다른 제품들의 spec.을 보게 되었는데,
다양한 크기와 형광스펙트럼 그리 다양한 표면 기능기를 갖는 microsphere가 있다는 것을 알게 되었습니다.
제가 관심을 갖고 본 것은 amine modified microsphere, carboxylate modified microsphere, aldehyde sulfate microsphere였습니다. 각각의 표면에 맞는 항체 고정화 방법이 제시되어 있어 참 편리한 세상이구나 하는 생각이 들었습니다. 이러한 표면 기능기는 나름대로 본연의 기능이 있을 것으로 보이는데 설명서를 읽어보면 프로토콜은 다르지만 amine이든 carboxylate든 상관없이 항체를 붙일 수 있는 것으로 되어 있습니다.
제가 궁금한 것은 amine기가 있는 microsphere와 carboxylate가 있는 microsphere는 분명 용도가 다를 것이라 생각됩니다. 예를들어 A라는 class의 항체는 amine modified microsphere에 고정화하는 것이 좋고, B라는 class의 항체는 carboxylate modified microsphere에 붙여한다거나 아니면 실험이 수행되는 생화학적 환경에 따라 취사선택해서 사용해야 한다거나 하는 등의 내용입니다.
사용자의 취향이나 구미에 맞게 취사선택해서 사용하는 것인지
아니면 나름대로 목적과 용도가 다른 것인지 이런 microsphere를 사용해 보신 경험이 있으신 분들의 조언을 듣고 싶습니다.
- microsphere
- polystyrene
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
장성재님의 답변
2007-10-31- 0
잘알고 계시겠지만, 대표적인 fluorescent microsphere에는 표면 기능기에 따라서 amine-modified, carboxylate-modified, aldehyde-sulfate, sulfate 등의 네 가지 반응기에 따라서 분류가 됩니다. - Carboxylate-modified: 카르복실기가 반응기로써 단백질들, EDAC와 같은 수용성 carbodiimide reagent를 사용하여 아민기를 포함하는 biomolecules과 공유결합 가능합니다. - Sulfate: 비교적 친수성 입자로 거의 모든 단백질들의 passive, nearly irreversible한 흡착을 유도합니다. 주로 알부민, IgG, avidin, streptavidin의 흡착에 이용합니다. - Aldehyde-sulfate:위의 sulfate microsphere에 aldehyde기를 추가한 것 입니다. 매우 온화한 조건 하에서 단백질 및 아민류와의 결합이 가능합니다. - Amine-modified: 매우 넓은 범위의 아민과 반응하는 모든 물질과 결합 반응이 가능합니다. 단백질의 카르복실기를 포함한 succinimidyl ester 및 isothiocyanates 등과도 반응하며, SPDP (succinimidyl 3-(2-pyridyldithio)propionate) 등과도 반응하여 sufhydryl group을 갖는 microsphere의 제작에도 사용 가능합니다. 기타 자세한 사항은 Molecular Probes의 홈페이지에서 가져온 자료를 첨부하오니 참고하시기 바랍니다.