2007-11-07
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이선민(danji2026)
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MTT를 하거나 다른 Cell culture를 할때 sample 1mg을 DMSO 1ml에 녹였습니다.
DMSO가 독성이 있다고 들었습니다. 그럼 이것을 cell에 처리할때 DMSO농도는 몇 %이하가 되어야 하는 건가요?
- MTT
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답변 2
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답변
장성재님의 답변
2007-11-07- 0
DMSO에 대한 세포의 독성은 세포의 종류에 따라 차이가 있습니다. MTT assay의 경우 물론 세포의 viability를 측정하는 방법이므로 독성이 있는 DMSO를 넣으시면 안됩니다. MTT assay에서 DMSO의 처리는 마지막 단계에서 세포 내의 formazan crystal을 추출할 때에 사용하는 것 입니다. DMSO 대신 isopropanol을 사용하기도 합니다. MTT 시약의 경우 배지나 버퍼에도 잘 녹으므로 꼭 DMSO에 녹이실 필요는 없습니다. retinoic acid와 같은 water insoluble한 시약을 녹일 때에 DMSO를 사용합니다만, 에탄올을 사용하기도 합니다. 물론 세포에 따라 차이가 있긴 합니다. DMSO의 처리로 세포를 분화시키기도 하니, 실험 하시는 환경에 맞추어 조절하실 필요가 있겠네요. 원하시는 시약을 DMSO에 녹여서 사용하실 때에는 실험의 control 군으로써 DMSO만을 처리한 세포를 준비하실 필요가 있습니다. -
답변
조희영님의 답변
2007-11-08- 0
어떤 세포를 사용하는지 모르겠지만 일반적으로 많이 쓰는 CHO-K1, HEK293 등의 경우에 sample을 가할 때 들어가는 DMSO의 양은 0.5%를 넘지 않는게 좋습니다. DMSO를 최대한 1% 까지 사용해 볼 수는 있으나 항상 negative control에도 같은 농도의 DMSO를 처리해 주어서 용매 자체의 독성을 보정해 주어야 합니다. 민감한 세포인 경우는 DMSO자체의 독성만 미리 test하고 실험을 시작하는것이 좋을 듯 함. >MTT를 하거나 다른 Cell culture를 할때 sample 1mg을 DMSO 1ml에 녹였습니다. >DMSO가 독성이 있다고 들었습니다. 그럼 이것을 cell에 처리할때 DMSO농도는 몇 %이하가 되어야 하는 건가요? > >