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지식나눔

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bradford assay방법에서

2007-11-15 org.kosen.entty.User@54640751 박경인(suvha)
  • 1
bradford assay방법에서 standard로 BSA를 쓰는데 왜 BSA인지 궁금합니다... 그리고 추세선을 긋고 나서 y = 0.0258x + 0.002 R2 = 0.9995 이런식이 나왔는데요 여기서 y=흡광도이고, x=단백질농도, R2는 무엇인가요? 답변부탁드립니다~~~
  • bradford assay
  • BSA
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답변 1
  • 답변

    김윤상님의 답변

    2007-11-16
    • 0
    BSA를 쓰는 이유는, 이것이 이미 순수하게 정제되어 판매되고 있으며, 따라서 정량하기 전에 이미 단백질의 양(그리고 농도)을 알고 있는 단백질이기 때문입니다. (혹시 농도 혹은 양을 알고 있는 다른 단백질이 있다면 BSA 대신 쓸 수도 있겠습니다만) 단백질 정량을 위한 표준용액을 만들때, BSA 분말 일정량을 녹여서 만들거나, 농도를 이미 알고 있는 BSA 용액을 희석해서 만들어 쓰는 것이 일반적입니다. 추세선 혹은 R2 (이건 R의 제곱입니다)에 관해서는 여기서 설명드리기는 곤란하고, 님께서 공부를 하셔야 하는 부분입니다. 통계에서 선형회귀분석(Linear regression)에 관한 것입니다. R2는 Coefficient of determination 혹은 Correlation coefficient 이라고 합니다. R-squared value 라고도 하는 이 값은 0에서 1 사이의 값을 가지며, 1에 가까울수록 예측치와 실제값이 근접하게 됩니다. 님께서 Standard curve를 그렸을 때, 1에 가깝게 나올수록 잘 되어진 assay 라고 할 수도 있습니다만, 단백질 정량의 특성상 linear로 나오는 농도 구간이 제한되어 있기 때문에, 꼭 절대적인 기준은 아닙니다.
    답변수정
    BSA를 쓰는 이유는, 이것이 이미 순수하게 정제되어 판매되고 있으며, 따라서 정량하기 전에 이미 단백질의 양(그리고 농도)을 알고 있는 단백질이기 때문입니다. (혹시 농도 혹은 양을 알고 있는 다른 단백질이 있다면 BSA 대신 쓸 수도 있겠습니다만) 단백질 정량을 위한 표준용액을 만들때, BSA 분말 일정량을 녹여서 만들거나, 농도를 이미 알고 있는 BSA 용액을 희석해서 만들어 쓰는 것이 일반적입니다. 추세선 혹은 R2 (이건 R의 제곱입니다)에 관해서는 여기서 설명드리기는 곤란하고, 님께서 공부를 하셔야 하는 부분입니다. 통계에서 선형회귀분석(Linear regression)에 관한 것입니다. R2는 Coefficient of determination 혹은 Correlation coefficient 이라고 합니다. R-squared value 라고도 하는 이 값은 0에서 1 사이의 값을 가지며, 1에 가까울수록 예측치와 실제값이 근접하게 됩니다. 님께서 Standard curve를 그렸을 때, 1에 가깝게 나올수록 잘 되어진 assay 라고 할 수도 있습니다만, 단백질 정량의 특성상 linear로 나오는 농도 구간이 제한되어 있기 때문에, 꼭 절대적인 기준은 아닙니다.
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