2007-11-15
org.kosen.entty.User@324d28dc
박경인(suvha)
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질문이 이상한 것 같아서 올리기 쑥쓰러운데요 ;;;;
protein expression을 하고 있습니다.
data를 정리하다가
OD600의 cell수는 시간이 지남에 따라 증가하다가 감소하는 곡선을 보이고
protein 농도의 경우는 cell이 감소함에도 계속 증가하는 곡선을 보이는데요
이를 어떻게 해석해야하는지요 ;;~
답변 부탁드려요~~~
- protein expression
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답변 1
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답변
장성재님의 답변
2007-11-16- 0
절대 이상한 결과가 아닙니다. 어떤 배양법을 사용하셨는지 모르지만, 일반적인 batch culture에서는 영양분의 고갈 및 pH의 변화 등으로 인해 세포의 성장은 감소하는 것이 당연합니다. 그리고, E.coli를 이용한 외래 단백질의 고발현 시스템을 사용하셨을 테니까, IPTG 등의 inducer를 첨가한 시점부터 무리하게 외래 단백질의 생산에 모든 노력을 기울이게 되므로, 세포의 성장 (DNA의 합성 등)은 정지 상태에 이르게 됩니다. 물론, 단백질의 생산은 증가되겠지요. 따라서, O.D.(600)은 감소하지만, 외래 단백질의 생산은 증가하는 것 입니다. 세포의 수가 줄어드는 포인트와 단백질의 생산이 최고가 되는 포인트를 검토하셔서 최적의 생산 조건을 확립하시는 것이 중요하답니다. 추가: 때로는 발현시킨 외래 단백질에 의한 세포독성으로 세포의 성장이 급격히 떨어지는 경우도 있으니, 그것과 관련된 자료를 검토해보시길 바랍니다.