2007-11-30
org.kosen.entty.User@48bcc707
김주미(imuj)
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systemic 한 knockout 시 lethal이 일어난다는 사실이 대부분 보고 되어 있는 gene 인데요, 이번에 brain 에서만 knockout 시켰다는것이 보고가 된게 있네요..
제가 이 분야에 대해선 문외한이라서요..
특정 조직 내에서만 knock out 시킨다는 것이 어떤 기작에 의해 가능한 건가요??
- knock out
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장성재님의 답변
2007-11-30- 0
'conditional' knockout mice를 말씀하시는 것 같군요. 님께서 잘 아시고 계시듯이 systemic knock의 경우 발생 과정에서 중요한 역할을 하는 유전자의 경우 lethal이 일어나므로, phenotype을 확인할 수가 없지요. 그래서 개발된 방법이 'conditional' knockout인데요. 특정 조직에서만 knockout이 유도되도록 조절이 가능하도록, cre-loxP라는 개념을 도입한 것이 일반적으로 많이 사용되는 방법입니다. loxP라는 34개로 구성된 특정 염기 서열을 인식하는 cre recombinase 유전자를 조직 특이적 프로모터의 하류에 도입한 transgene 마우스와 같은 방향의 loxP 사이에 타겟 유전자를 포함하는 유전자를 도입한 transgene 마우스를 교배시킴으로 특정 조직에서의 gene knockout이 된 마우스의 제작이 가능하게 됩니다. cre-loxP 이외에도 site-specific recombination을 유도하는 시스템들도 개발되어 있으니 좀더 자세한 내용은 직접 관련 논문과 서적을 참고하셔서 공부하시는 것이 좋겠죠...수많은 관련 논문들이 있으며, 인터넷 상에서도 'conditional knockout mice'로 검색을 하시면 수많은 정보를 얻으실 수 있을 겁니다.^^ -
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김현선님의 답변
2007-12-01- 0
>systemic 한 knockout 시 lethal이 일어난다는 사실이 대부분 보고 되어 있는 gene 인데요, 이번에 brain 에서만 knockout 시켰다는것이 보고가 된게 있네요.. >제가 이 분야에 대해선 문외한이라서요.. >특정 조직 내에서만 knock out 시킨다는 것이 어떤 기작에 의해 가능한 건가요?? > > > cre-loxP 방법도 있고, 유전자 발현을 하기위해서는 promter가 필요한데요 우리 몸 세포에 핵은 모두 같은 유전자이지만 각 기관별로 발생되는 기관은 제 각각이잖아요 이것은 바로 각 기관별로 promoter 활성이 다르기 때문입니다. 온몸에서 발현되게끔 하는 promoter(PGK promoter), liver 에만 발현하게끔 하는 promoter, lung에만 발현하는 promoter... 등등 이런 promoter를 치환유전자 앞에 같이 붙여서 만든 DNA를 embryo에 injection 해줍니다. 쉽게 설명하려고 했지만 잘 와 닿았는지 모르겠네요. cre-loxp는 유전자 자체는 남겨두고 promoter 활성만 없애는거고요 유전자 치환방법은 타겟유전자 자체를 다른 유전자(아무 기능이 없는)로 바꾸어 넣어주는 방법이에요. 이해가 잘 안되신다면 다시 질문해주세요