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지식나눔

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RNA의 보관과 관련해서 문의드립니다.

2007-12-07 org.kosen.entty.User@3e30d772 유용규(abiho)
  • 2
문헌조사과정에서 [ For short-term storage (several weeks), store RNA in aqueous solution at -20'C. For more stable long-term storage, store RNA in ethanol. Add NaCl to 0.25M to RNA in aqueous solution, add 2.5 vol of 95% ethanol, mix well, and store at -20'C ] 라는 내용을 봤는데요...... 이방법보다 더 좋은 방법이 있나요? 아시는분들의 답변 기다립니다. 즐거운 연말되세요
  • RNA
  • stable stroage
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답변 2
  • 답변

    조홍식님의 답변

    2007-12-08
    • 0
    RNA는 분리 즉시 사용하는것이 가장 좋겠지요.. 하지만 일을 하다보면 그게 잘 않되지요. 좋은 방법이라기 보다는 저희가 쓰는 solution 을 알려드리자면, 저희는 cell 인 경우에는 Trizol을 사용하고, tissue 인 경우에는 잘게 잘라서 RNAlater (Ambion) 에 넣어서 보관합니다. 자세한 프로토콜은 web에서 위의 solution 이름을 치시면 찾으실수 있습니다. 그럼.... >문헌조사과정에서 > >[ For short-term storage (several weeks), store RNA in aqueous solution at -20'C. For more stable long-term storage, store RNA in ethanol. Add NaCl to 0.25M to RNA in aqueous solution, add 2.5 vol of 95% ethanol, mix well, and store at -20'C ] > >라는 내용을 봤는데요...... > >이방법보다 더 좋은 방법이 있나요? > >아시는분들의 답변 기다립니다. > >즐거운 연말되세요
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    RNA는 분리 즉시 사용하는것이 가장 좋겠지요.. 하지만 일을 하다보면 그게 잘 않되지요. 좋은 방법이라기 보다는 저희가 쓰는 solution 을 알려드리자면, 저희는 cell 인 경우에는 Trizol을 사용하고, tissue 인 경우에는 잘게 잘라서 RNAlater (Ambion) 에 넣어서 보관합니다. 자세한 프로토콜은 web에서 위의 solution 이름을 치시면 찾으실수 있습니다. 그럼.... >문헌조사과정에서 > >[ For short-term storage (several weeks), store RNA in aqueous solution at -20'C. For more stable long-term storage, store RNA in ethanol. Add NaCl to 0.25M to RNA in aqueous solution, add 2.5 vol of 95% ethanol, mix well, and store at -20'C ] > >라는 내용을 봤는데요...... > >이방법보다 더 좋은 방법이 있나요? > >아시는분들의 답변 기다립니다. > >즐거운 연말되세요
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  • 답변

    김윤상님의 답변

    2007-12-08
    • 0
    RNA를 추출하기 전이라면 모를까, 일단 RNA를 분리하신 다음이라면,... 님께서 조사하신 내용이 제일 좋은 방법입니다. 다시 정리하고 약간 추가하자면, 1. 단기간 저장하시는 경우에는 1) RNase-free H2O (with 0.1 mM EDTA) 혹은 TE buffer (10 mM Tris, 1mM EDTA) 좋습니다. -80° C 에서 1년간 마그네슘이나 다른 metals을 EDTA로 chelate 해 주면 좋습니다. 물론, RNase-free EDTA를 쓰셔야 합니다. 2) formamide solution 에 녹이시면 -20°C 에서 최소 1년간 보관이 가능합니다. 2. 장기간 저장시에는 -20°C 에서 ethanol precipitates (75% 에탄올에 담겨 있는) 형태로 오랫동안 저장이 가능합니다. 물론, 이런 경우 원심분리하여 pellet을 만들고 RNase-free H2O에 녹여야 하는 불편이 있습니다만....
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    RNA를 추출하기 전이라면 모를까, 일단 RNA를 분리하신 다음이라면,... 님께서 조사하신 내용이 제일 좋은 방법입니다. 다시 정리하고 약간 추가하자면, 1. 단기간 저장하시는 경우에는 1) RNase-free H2O (with 0.1 mM EDTA) 혹은 TE buffer (10 mM Tris, 1mM EDTA) 좋습니다. -80° C 에서 1년간 마그네슘이나 다른 metals을 EDTA로 chelate 해 주면 좋습니다. 물론, RNase-free EDTA를 쓰셔야 합니다. 2) formamide solution 에 녹이시면 -20°C 에서 최소 1년간 보관이 가능합니다. 2. 장기간 저장시에는 -20°C 에서 ethanol precipitates (75% 에탄올에 담겨 있는) 형태로 오랫동안 저장이 가능합니다. 물론, 이런 경우 원심분리하여 pellet을 만들고 RNase-free H2O에 녹여야 하는 불편이 있습니다만....
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