2007-12-27
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이선민(danji2026)
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MTT 실험을 하기 위해 A라는 물질1mg을 DMSO 1ml에 녹여서 1mg/ml을 만들었습니다. 이것을 10ul를 떠서 cell에 처리하여 실험을 하였습니다. 보통 DMSO는 독성이 있어서 배지의 2%(final 농도)이내에 넣으라는 말을 들었습니다. 저는 48well을 사용하기 때문에 300ul의 배지를 넣었습니다. 그럼 배지의 2%이면 DMSO가 6ul이내로 들어가야 한다는 것인데 제가 실험을 했을때는 A(1mg/mlin DMSO)을 10ul 처리하였을때 cell이 80%정도 inhibition되었습니다. 이것도 toxic한 농도 인가요??
- MTT
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답변 2
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조희영님의 답변
2007-12-27- 0
DMSO는 물보다 무겁기 때문에 희석하지 않고 세포가 있는 well-plate에 DMSO에 녹인 샘플을 바로 넣으면 DMSO가 가라앉아 세포에 치명적인 손상을 줍니다. 비록 1% 이하 이더라도 세포에 닿는 농도는 일시적으로 굉장히 높아서 바로 다시 pipetting 해 준다고 해도 샘플의 효과보다는 DMSO때문에 세포가 죽습니다. DMSO는 꼭 희석해서 넣어야 하며 일반적으로 0.5% 이내면 큰 손상을 주지 않으나 세포마다 DMSO에 대한 sensitivity는 다름. >MTT 실험을 하기 위해 A라는 물질1mg을 DMSO 1ml에 녹여서 1mg/ml을 만들었습니다. 이것을 10ul를 떠서 cell에 처리하여 실험을 하였습니다. 보통 DMSO는 독성이 있어서 배지의 2%(final 농도)이내에 넣으라는 말을 들었습니다. 저는 48well을 사용하기 때문에 300ul의 배지를 넣었습니다. 그럼 배지의 2%이면 DMSO가 6ul이내로 들어가야 한다는 것인데 제가 실험을 했을때는 A(1mg/mlin DMSO)을 10ul 처리하였을때 cell이 80%정도 inhibition되었습니다. 이것도 toxic한 농도 인가요?? > -
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한재석님의 답변
2008-01-01- 0
앞서 답변해 주신 것과 같이 세포들마다 senstive한 정도가 다르니, A라른 물질을 넣지 않고 그냥 DMSO만 세포에 처리해 보면 알 수 있으리라 생각됩니다. 즉 A를 포함하거나 포함하지 않은 DMSO를 동시에 cell에 처리하고 그 결과를 비교해보면 이것이 A라는 물질의 독성인지 아니면 DMSO의 독성인지 쉽게 알 수 있을 겁니다. >MTT 실험을 하기 위해 A라는 물질1mg을 DMSO 1ml에 녹여서 1mg/ml을 만들었습니다. 이것을 10ul를 떠서 cell에 처리하여 실험을 하였습니다. 보통 DMSO는 독성이 있어서 배지의 2%(final 농도)이내에 넣으라는 말을 들었습니다. 저는 48well을 사용하기 때문에 300ul의 배지를 넣었습니다. 그럼 배지의 2%이면 DMSO가 6ul이내로 들어가야 한다는 것인데 제가 실험을 했을때는 A(1mg/mlin DMSO)을 10ul 처리하였을때 cell이 80%정도 inhibition되었습니다. 이것도 toxic한 농도 인가요?? >