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지식나눔

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AAS를 할려고 하는데요~

2008-01-27 org.kosen.entty.User@178942a9 박경인(suvha)
  • 3
분비된 단백질이 Fe을 함유하는지 얼마나 함유하는지를 알아보기 위해 AAS(atomic absorption spectrometry)을 할려고 합니다. 첨 해보는데 다른 논문들은 보면 intracellular에서 주로 했던데요 저는 상층액에서 단백질 sample을 모으거든요 AAS를 하기 위해서 sample을 어떻게 준비해하는지요? HNO3와 HCL로 microwave에서 digest를 하던데 이는 금속만 남겨 하려는 건가요? 알고계신 분 정보 부탁드립니다~~~~
  • AAS
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답변 3
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    강광철님의 답변

    2008-01-27
    • 0
    > 상층액에서 sample한것을 질산이나 염산으로 조각내면 무기물질만 남으니깐 태우면 무기원소 만 그파장에서 분석이 되겠지요. 유기물인 단백질은 분석이 aas에서는 안되구요. ICP-MASS로 분석해도 시료의전처리는 거의똑같아요..
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    > 상층액에서 sample한것을 질산이나 염산으로 조각내면 무기물질만 남으니깐 태우면 무기원소 만 그파장에서 분석이 되겠지요. 유기물인 단백질은 분석이 aas에서는 안되구요. ICP-MASS로 분석해도 시료의전처리는 거의똑같아요..
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  • 답변

    김정렬님의 답변

    2008-01-27
    • 0
    안녕하세요. AAS 를 사용하기 전에 몇가지 당부를 드리고자 합니다. 왜냐면, 요즘은 ICP 니 해서 좋은 장비들이 많이 나와서 AAS 를 사용하시는 분이 적기 때문에 말씀드리고자 합니다. AAS 가 원리에서 나와있는 것과 같이. 고순도 아세틸렌 가스와 N2O 와 습기가 없는 압축공기를 사용하기 때문에 사용하기 전에 먼저 주변 장치들에 대한 것을 점검하시면 좋겠습니다. 공부도하시고요. 모두다 폭발성가스이기 때문입니다. 돌다리도 집고넘어가면 좋겠습니다. 1. 장비가 오랫동안 사용하지 않은 상태 파악(이라면, 배기 점검 꼭 부탁드립니다.) 2. 여러가지 금속을 장착이 가능한 장비 파악 아울러, 수집한 단백질이 인체와 관련된 것이라면, 다른 금속 건(Gun) 도 함께보시면 좋겠습니다. 다른 설명은 윗 분께서 설명을 잘 해주셨기 때문에 사족이라고 판단이 됩니다. 연구에 도움이 되었으면 합니다. >분비된 단백질이 Fe을 함유하는지 얼마나 함유하는지를 알아보기 위해 >AAS(atomic absorption spectrometry)을 할려고 합니다. >첨 해보는데 >다른 논문들은 보면 intracellular에서 주로 했던데요 >저는 상층액에서 단백질 sample을 모으거든요 >AAS를 하기 위해서 sample을 어떻게 준비해하는지요? >HNO3와 HCL로 microwave에서 digest를 하던데 이는 금속만 남겨 하려는 건가요? >알고계신 분 정보 부탁드립니다~~~~ > > > >
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    안녕하세요. AAS 를 사용하기 전에 몇가지 당부를 드리고자 합니다. 왜냐면, 요즘은 ICP 니 해서 좋은 장비들이 많이 나와서 AAS 를 사용하시는 분이 적기 때문에 말씀드리고자 합니다. AAS 가 원리에서 나와있는 것과 같이. 고순도 아세틸렌 가스와 N2O 와 습기가 없는 압축공기를 사용하기 때문에 사용하기 전에 먼저 주변 장치들에 대한 것을 점검하시면 좋겠습니다. 공부도하시고요. 모두다 폭발성가스이기 때문입니다. 돌다리도 집고넘어가면 좋겠습니다. 1. 장비가 오랫동안 사용하지 않은 상태 파악(이라면, 배기 점검 꼭 부탁드립니다.) 2. 여러가지 금속을 장착이 가능한 장비 파악 아울러, 수집한 단백질이 인체와 관련된 것이라면, 다른 금속 건(Gun) 도 함께보시면 좋겠습니다. 다른 설명은 윗 분께서 설명을 잘 해주셨기 때문에 사족이라고 판단이 됩니다. 연구에 도움이 되었으면 합니다. >분비된 단백질이 Fe을 함유하는지 얼마나 함유하는지를 알아보기 위해 >AAS(atomic absorption spectrometry)을 할려고 합니다. >첨 해보는데 >다른 논문들은 보면 intracellular에서 주로 했던데요 >저는 상층액에서 단백질 sample을 모으거든요 >AAS를 하기 위해서 sample을 어떻게 준비해하는지요? >HNO3와 HCL로 microwave에서 digest를 하던데 이는 금속만 남겨 하려는 건가요? >알고계신 분 정보 부탁드립니다~~~~ > > > >
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  • 답변

    김재필님의 답변

    2008-01-28
    • 0
    >분비된 단백질이 Fe을 함유하는지 얼마나 함유하는지를 알아보기 위해 >AAS(atomic absorption spectrometry)을 할려고 합니다. >첨 해보는데 >다른 논문들은 보면 intracellular에서 주로 했던데요 >저는 상층액에서 단백질 sample을 모으거든요 >AAS를 하기 위해서 sample을 어떻게 준비해하는지요? >HNO3와 HCL로 microwave에서 digest를 하던데 이는 금속만 남겨 하려는 건가요? >알고계신 분 정보 부탁드립니다~~~~ > > > > 안녕하십니까. 제가 아는 수준에서 답변 드립니다. 기본적으로 단백질에서 AAS,ICP-ES,ICP-MS로 Fe을 보시고자 하는 경우는 시료인 단백질 기질 (matrix)을 파괴해야만 합니다. 다시 말해서 님께서 하시고자 하는 AAS는 단백질 내의 Fe이 어느 위치에 어떤 형태로 결합되어 있는지와 같은 구조적 정보를 주지 못합니다. 단지, 님께서 채취한 시료안에 Fe이 총 얼마나 들어 있는지를 알려줍니다. ICP-ES,ICP-MS 또한 마찬가지 입니다. 정확하고 원할한 측정을 위해서 시료를 전처리 하는 것이지요. 다만, 한 가지 우려는 직접 님의 시료를 보지 못해서 그런데 HNO3+HCl만 가지고 단백질 매트릭스를 깨끗하게 분해할 수 있을지는 모르겠습니다. 다행인 것은 마이크로웨이브를 사용하니까 보통의 open 상태에서 가열, 분해하는 것보단 더 잘 되겠습니다. 감사합니다.
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    >분비된 단백질이 Fe을 함유하는지 얼마나 함유하는지를 알아보기 위해 >AAS(atomic absorption spectrometry)을 할려고 합니다. >첨 해보는데 >다른 논문들은 보면 intracellular에서 주로 했던데요 >저는 상층액에서 단백질 sample을 모으거든요 >AAS를 하기 위해서 sample을 어떻게 준비해하는지요? >HNO3와 HCL로 microwave에서 digest를 하던데 이는 금속만 남겨 하려는 건가요? >알고계신 분 정보 부탁드립니다~~~~ > > > > 안녕하십니까. 제가 아는 수준에서 답변 드립니다. 기본적으로 단백질에서 AAS,ICP-ES,ICP-MS로 Fe을 보시고자 하는 경우는 시료인 단백질 기질 (matrix)을 파괴해야만 합니다. 다시 말해서 님께서 하시고자 하는 AAS는 단백질 내의 Fe이 어느 위치에 어떤 형태로 결합되어 있는지와 같은 구조적 정보를 주지 못합니다. 단지, 님께서 채취한 시료안에 Fe이 총 얼마나 들어 있는지를 알려줍니다. ICP-ES,ICP-MS 또한 마찬가지 입니다. 정확하고 원할한 측정을 위해서 시료를 전처리 하는 것이지요. 다만, 한 가지 우려는 직접 님의 시료를 보지 못해서 그런데 HNO3+HCl만 가지고 단백질 매트릭스를 깨끗하게 분해할 수 있을지는 모르겠습니다. 다행인 것은 마이크로웨이브를 사용하니까 보통의 open 상태에서 가열, 분해하는 것보단 더 잘 되겠습니다. 감사합니다.
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