2008-01-27
org.kosen.entty.User@286be933
박재영(love8133)
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WT strain을 casein agar plate에 발라서 길러서
extracellular matix로 분비되는 protease가 있는지 알아보고 싶습니다.
그래서 LB 성분을 포함하는 casein agar plate를 만들고 싶은데
조성과 그 만드는 법좀 가르쳐 주시면 감사하겠습니다.
casein은 protein이니까 autoclave 돌리면 안되잖아요?
그래니 배지 섞는 법이 좀 틀리다던데..
- casein
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답변 1
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답변
유용규님의 답변
2008-01-28- 0
단백질 가수분해능을 조사하는 방법의 하나로 세균을 백금이로 도말하고 약 14일간 배양한 후 균체 주위에 투명환이 나타나는지 조사합니다. 탈지우유에 함유된 락토오스가 발효되면서 생성된 산에 의해서 카제인 분해가 저해될 수 있는데.... 이를 방지하기 위해서, 탈지우유를 투석(dialysis)하여 배지에 첨가하면 확실한 결과를 알 수 있습니다. 만일 탈지우유를 그냥 사용하였을 때는 20% HCl에 10%로 녹인 HgCl2를 평판에 가하여 투명환이 사라지면 카제인이 분해된 것이 아닙니다. Nutrient agar 11.5g과 skim milk 50g을 넣고(1리터 증류수) 114'C에서 15분동안 습윤멸균한 후에 멸균된 Petri dish에 부어서 사용하시면 되구요... 색이 갈색으로 변하거나 순두부처럼 되면 사용하지 마세요 또 사용전에 하루정도 37도에 방치해서 오염유무도 확인하시고 사용하시는게 좋아요 Casein agar 만드실때는 다른것들하구 같이 꽉꽉채우지 마세요.... 과열되면서 순두부처럼 되기 십상입니다.