지식나눔

mammalian cell culture을 통해 얻은 cell lysate에서 mdm2 protein을 western blotting detection.

cell(Hela, MCF-7, NIH3T3, HepG2. HaCaT) line에서 mdm2 protein을 detection하려고 합니다. 근데 생각처럼 쉽게 나오지가 않습니다. 이 mdm2 protein을 western blotting으로 detection 하려고 하는데 있어서.. 기술적 방법이나 노하우를 알고 싶습니다. 저희가 사용하는 antibody는 산타크루즈 제품으로써 sc-5304제품을 사용하고 있습니다. 어떻게 하면 detection을 잘 할수 있는지 알려주세요~~
  • mdm2
  • western blotting
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답변 1
  • 답변

    장성재님의 답변

    sc-5304의 메뉴얼에 나온 것과 같은 Jurkat whole cell lysate를 사용하거나, 기타 논문에서 언급된 positive control을 이용해서 총 단백질 양을 농도별로, 또한 항체의 농도를 농도별로 조정하며 조건을 검토하시는 것이 최선의 방법일 듯 싶군요.
    sc-5304의 메뉴얼에 나온 것과 같은 Jurkat whole cell lysate를 사용하거나, 기타 논문에서 언급된 positive control을 이용해서 총 단백질 양을 농도별로, 또한 항체의 농도를 농도별로 조정하며 조건을 검토하시는 것이 최선의 방법일 듯 싶군요.
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