2008-02-25
org.kosen.entty.User@33249c6b
민경난(greeny11)
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현재 C57BL6, db/db 마우스를 이용하여 당뇨실험을 하고 있습니다.
마우스에 약물을 투여하고 일정 시간간격(0,15,30,45,60,120,180,240 분)으로
미정맥으로부터 채혈하여 혈당과 인슐린(ELISA kit)을 측정하려고 합니다.
50 ul 정도 채혈해야 plasma insulin 측정이 가능할 것 같은데.
마우스에서 8번이나 연속해서 꼬리정맥에서 50 ul씩 채혈이 가능할지와
또 이렇게 많은 혈액 채혈하는 것 자체가 마우스 생리학상 영향을 미칠 것 같은데
이러한 data를 믿을 수 있을지도 의문입니다.
여러 고수님들의 많은 도움 부탁드리겠습니다.
- insulin
- mice
- diabetes
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 4
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답변
정우민님의 답변
2008-02-25- 0
>현재 C57BL6, db/db 마우스를 이용하여 당뇨실험을 하고 있습니다. > >마우스에 약물을 투여하고 일정 시간간격(0,15,30,45,60,120,180,240 분)으로 > >미정맥으로부터 채혈하여 혈당과 인슐린(ELISA kit)을 측정하려고 합니다. > >50 ul 정도 채혈해야 plasma insulin 측정이 가능할 것 같은데. > >마우스에서 8번이나 연속해서 꼬리정맥에서 50 ul씩 채혈이 가능할지와 > >또 이렇게 많은 혈액 채혈하는 것 자체가 마우스 생리학상 영향을 미칠 것 같은데 > >이러한 data를 믿을 수 있을지도 의문입니다. > >여러 고수님들의 많은 도움 부탁드리겠습니다. > > > base line(0 min)에서 부터 240min 까지 채혈 후 마우스를 살려야 하는 건지 모르겠지만 보통 당뇨실험시 Glucose tolerance test(GTT)와 homa ir 검사를 위해서 포도당 주사 후 0, 15, 30, 60, 120min 꼬리정맥에서 총 5번을 Capillary tube에 채혈을 합니다. 그리고 이렇게 채혈한 총 5번의 serum으로 insulin ELISA assye를 하구요... 경험상 3회이상은 채혈하기가 힘들더군요... 꼬리를 점점 위로 잘라가면서 억지로한다면 가능 하기야 하겠지만... 너무 횟수가 많은것 같기도 합니다. 그리고 50ul이 아니라 5ul아닌가요? 보통 5ul이면 분석가능 합니다. 어쨌든 그부분은 다시 한번 알아보시고 만약 5ul이라면 0.006g 밖에 안되는 극소량입니다. 따라서 케필러리(헤파린) 튜프에 혈액을 받으시고 원심분리하실 튜브에 케필러리튜브를 넣고 반대쪽으로 입으로 후..불어서 원심분리 후 상층액을 겉으시면 충분히 5ul은 나옵니다. 그리고 제 생각에는 꼭 8회가 아니더라도 인슐린의 변화양상을 보기엔 충분할 것같은데요?? 끝으로 실례입니다만 어느학교에 계시는지 좀 알고싶어요. -
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이유진님의 답변
2008-02-26- 0
>현재 C57BL6, db/db 마우스를 이용하여 당뇨실험을 하고 있습니다. > >마우스에 약물을 투여하고 일정 시간간격(0,15,30,45,60,120,180,240 분)으로 > >미정맥으로부터 채혈하여 혈당과 인슐린(ELISA kit)을 측정하려고 합니다. > >50 ul 정도 채혈해야 plasma insulin 측정이 가능할 것 같은데. > >마우스에서 8번이나 연속해서 꼬리정맥에서 50 ul씩 채혈이 가능할지와 > >또 이렇게 많은 혈액 채혈하는 것 자체가 마우스 생리학상 영향을 미칠 것 같은데 > >이러한 data를 믿을 수 있을지도 의문입니다. > >여러 고수님들의 많은 도움 부탁드리겠습니다. > > > > 언젠가 마우스채혈에 관해 답변을 드린 적이 있는데, 생각보다 주사기를 이용한 마우스 채혈이 쉽지않습니다. 그래서 눈 안쪽의 혈관을 모세관을 이용해서 채혈하는 방법을 추천한 적이 있었는데, 이렇게 빈번하게 같은 동물에서 채취한 적은 없어서 말씀드리기가 곤란하네요.. 50ul를 8번이면 400ul라는 계산인데 혈액양으로 봐서는 그다지 많지는 않은데, 채취방법이 정맥에서 채취할려면 힘들것 같습니다. 양쪽 눈을 번갈아가며 찌르는 방법이 있는데, 240분 정도면 죽지않고 버텨줄 것 같기도 하네요. 마취도 필요없고, 비교적 간단한 방법이니 눈쪽에서 채혈을 해보심이 어떠신지요? 좀 잔인하긴 하지만 확실한 채혈방법입니다. -
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정우민님의 답변
2008-02-27- 0
>현재 C57BL6, db/db 마우스를 이용하여 당뇨실험을 하고 있습니다. > >마우스에 약물을 투여하고 일정 시간간격(0,15,30,45,60,120,180,240 분)으로 > >미정맥으로부터 채혈하여 혈당과 인슐린(ELISA kit)을 측정하려고 합니다. > >50 ul 정도 채혈해야 plasma insulin 측정이 가능할 것 같은데. > >마우스에서 8번이나 연속해서 꼬리정맥에서 50 ul씩 채혈이 가능할지와 > >또 이렇게 많은 혈액 채혈하는 것 자체가 마우스 생리학상 영향을 미칠 것 같은데 > >이러한 data를 믿을 수 있을지도 의문입니다. > >여러 고수님들의 많은 도움 부탁드리겠습니다. > > > >윗분의 말씀에 동감하며 사족인것 같습니다만;;;; 안와정맥에서의 채혈은 숙달이 되지 않으신 분이라면 절대 비추라고 생각합니다. 시저로 꼬리끝부분을 아주 조금만 자른다해도 전혀 문제가 되지 않기 때문에 그게 더 편하지 않을까 생각합니다. 선택은 연구자님께서 잘 하시면 될 같으네요~ 하지만 문제는 제가 알기로 일반 insulin ELISA kit 은 50ul이 아니라 5ul의 serum 만 으로도 충분 한 걸로 알고있으니 잘 알아보세요`^^ -
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민경난님의 답변
2008-03-03- 0
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