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Cell culture

15% FBS DMEM media 를 사용하고 있는데요, 배양 중에 Cell에 sample을 처리하려고 하는데 sample이 EtOH 이나 DMSO같은 물질을 투여해도 지장이 없는지 궁금합니다. 그리고 물에 안녹는 물질을 Cell에 처리할 때 어떻게 녹여서 처리를 해야하죠?? 예를 들어 물에는 녹지 않고 EtOH에 녹는 물질을 투여해야 할 때 Cell에 지장이 있습니까? 그리고 있다면 어떤 문제 점이 있는지 궁금합니다. 고수님들 도와주세요~
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  • 답변

    장병기님의 답변

    윗 분 답변대로 지장이 있을 가능성이 많습니다. 따라서 적은 양의 DMSO 나 EtOH 을 사용하시는 것이 좋구요.. 예를 들어 최종 (100% EtOH+시약) 이 10 ml 배지에 5% 볼륨으로 500 ul 를 처리하셨다면 control 로써 5% EtOH 만을 처리한 실험군이 필요합니다. 이러면 아무것도 처리하지 않은 Control, Control-EtOH, Control-EtOH (시료1, 2, 3......) 이런 식으로 되겠죠? 결과 처리할때 Control, Control-EtOH 이 거의 차이가 없어야 합니다. 그럼 최적의 조건 잘 잡으시길 바랍니다. >15% FBS DMEM media 를 사용하고 있는데요, > >배양 중에 Cell에 sample을 처리하려고 하는데 > >sample이 EtOH 이나 DMSO같은 물질을 투여해도 지장이 없는지 궁금합니다. > >그리고 물에 안녹는 물질을 Cell에 처리할 때 어떻게 녹여서 처리를 해야하죠?? > >예를 들어 물에는 녹지 않고 EtOH에 녹는 물질을 투여해야 할 때 Cell에 지장이 있습니까? > >그리고 있다면 어떤 문제 점이 있는지 궁금합니다. > >고수님들 도와주세요~
    윗 분 답변대로 지장이 있을 가능성이 많습니다. 따라서 적은 양의 DMSO 나 EtOH 을 사용하시는 것이 좋구요.. 예를 들어 최종 (100% EtOH+시약) 이 10 ml 배지에 5% 볼륨으로 500 ul 를 처리하셨다면 control 로써 5% EtOH 만을 처리한 실험군이 필요합니다. 이러면 아무것도 처리하지 않은 Control, Control-EtOH, Control-EtOH (시료1, 2, 3......) 이런 식으로 되겠죠? 결과 처리할때 Control, Control-EtOH 이 거의 차이가 없어야 합니다. 그럼 최적의 조건 잘 잡으시길 바랍니다. >15% FBS DMEM media 를 사용하고 있는데요, > >배양 중에 Cell에 sample을 처리하려고 하는데 > >sample이 EtOH 이나 DMSO같은 물질을 투여해도 지장이 없는지 궁금합니다. > >그리고 물에 안녹는 물질을 Cell에 처리할 때 어떻게 녹여서 처리를 해야하죠?? > >예를 들어 물에는 녹지 않고 EtOH에 녹는 물질을 투여해야 할 때 Cell에 지장이 있습니까? > >그리고 있다면 어떤 문제 점이 있는지 궁금합니다. > >고수님들 도와주세요~
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    장성재님의 답변

    물론 님께서 걱정하시 듯 에탄올이나 DMSO를 세포에 처리할 경우 세포에 damage (cytotoxicity)를 유발할 수 있으며, 이들 용매에 의한 영향으로 원하시는 처리 물질에 의한 영향을 조사하실 수 없을 수 도 있습니다. 따라서, 최소한의 용매를 세포에 처리할 수 있도록 시료 (처리 물질)를 고농도로 용해시키신 후 사용하시길 권장합니다. 시료에 따라 차이가 있을 수 있으니 관련 논문을 참고하시는 것이 가장 좋겠습니다. 또한, 비교군 (control)으로 시료를 녹인 용매와 같은 양의 용매를 세포에 처리하여 비교 실험을 하시는 것이 필수이겠지요. 비수용성 물질의 경우 대부분 위와 같은 방식으로 특정 용매에 녹이신 후 사용하시는 것이 일반적입니다.
    물론 님께서 걱정하시 듯 에탄올이나 DMSO를 세포에 처리할 경우 세포에 damage (cytotoxicity)를 유발할 수 있으며, 이들 용매에 의한 영향으로 원하시는 처리 물질에 의한 영향을 조사하실 수 없을 수 도 있습니다. 따라서, 최소한의 용매를 세포에 처리할 수 있도록 시료 (처리 물질)를 고농도로 용해시키신 후 사용하시길 권장합니다. 시료에 따라 차이가 있을 수 있으니 관련 논문을 참고하시는 것이 가장 좋겠습니다. 또한, 비교군 (control)으로 시료를 녹인 용매와 같은 양의 용매를 세포에 처리하여 비교 실험을 하시는 것이 필수이겠지요. 비수용성 물질의 경우 대부분 위와 같은 방식으로 특정 용매에 녹이신 후 사용하시는 것이 일반적입니다.
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