2008-02-28
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박만재(pmj0804)
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안녕하십니까..
항상 코센에 많은 도움을 받고 있습니다.
이번에 형광 quenching에 관한 실험을 하게 되었습니다.
이런 spectrascopy 쪽은 기초적인 것도 잘 알지못하는 편이라 부끄러움을 무릅쓰고
여기에 질문을 올립니다.
형광 quenching 실험 후 acceptor 물질을 투입할 수록
donor 물질의 형광이 감소함을 관찰하게 되었는습니다.
이 감소된 형광 그래프를 이용하여 stern-volmer 도시를 그려봤으며
또한 association constant를 구하고자 하고 있습니다.
그런데 여기서 이해가 되지 않는 점은 stern-volmer 도시의 경우
직선으로 나와야 한다는 것으로 알고 있었는데 저의 실험의 경우 형광 감소가 크게 되어
그래프가 위로굽은 형으로 나왔습니다.
이럴 경우에는 stern-volmer도시를 적용할 수 없는지가 궁금하고
적용할 수 없다면 어떤 plot을 이용해야 할지 모르겠습니다.
또한 association constant를 구할려고 하는데
계산 방법에 대해 논문을 아무리 보아도 잘 이해가 가지 않으며 거기에 관해서
자세히 나와있는 곳을 찾기 힘들군요..그래서 코센 회원님들께 도움 부탁드립니다.
주위 사람들에게 물어봐도 잘 아는 사람이 없어 저의 궁금증만
점점 커져 가네요..^^;;
- binding constant
- association constant
- fluorescence
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
이상후님의 답변
2008-02-29- 0
위로 굽은 형(upward curvature)의 경우도 빈번히 발견되며 또한 association constant를 구할 수 있습니다. Upward curvature로 나오는 경우는 형광 quenching mechanism이 static quenching mechanism과 dynamic quencing mechanism 모두에 의해서 일어나고 있다는 의미입니다. 조금 더 자세한 내용을 공부하시려면 Eftink & Ghiron, Anal. Biochem., 1981, 114, 199-227.을 참조하세요. Linear가 아닐 경우는 nonlinear least square equation을 이용해서 association constant를 구할 수 있는데, 이때 위의 참고문헌에 보고된 modified Stern-Volmer eq'n을 사용해야 됩니다. 다음 eq'n 이 modified Stern-Volmer equation입니다. F = Fo(1/[1+Ksv[Q]])*exp(V/[Q]) 여기서, V와 Ksv는 Stern-Volmer static quenching constant와 dynamic quenching constant입니다. 더 자세한 내용은 설명하기 좀 어려운 부분이 있습니다. 논문을 참고해 보시기 바랍니다. 도움이 되셨기 바랍니다. -
답변
안길홍님의 답변
2010-01-27- 0
>안녕하십니까..>항상 코센에 많은 도움을 받고 있습니다. >이번에 형광 quenching에 관한 실험을 하게 되었습니다. >>이런 spectrascopy 쪽은 기초적인 것도 잘 알지못하는 편이라 부끄러움을 무릅쓰고 >여기에 질문을 올립니다. >형광 quenching 실험 후 acceptor 물질을 투입할 수록>donor 물질의 형광이 감소함을 관찰하게 되었는습니다. >>이 감소된 형광 그래프를 이용하여 stern-volmer 도시를 그려봤으며>또한 association constant를 구하고자 하고 있습니다. >그런데 여기서 이해가 되지 않는 점은 stern-volmer 도시의 경우>직선으로 나와야 한다는 것으로 알고 있었는데 저의 실험의 경우 형광 감소가 크게 되어>그래프가 위로굽은 형으로 나왔습니다. >이럴 경우에는 stern-volmer도시를 적용할 수 없는지가 궁금하고 >적용할 수 없다면 어떤 plot을 이용해야 할지 모르겠습니다. >>또한 association constant를 구할려고 하는데>계산 방법에 대해 논문을 아무리 보아도 잘 이해가 가지 않으며 거기에 관해서>자세히 나와있는 곳을 찾기 힘들군요..그래서 코센 회원님들께 도움 부탁드립니다. >>주위 사람들에게 물어봐도 잘 아는 사람이 없어 저의 궁금증만>점점 커져 가네요..^^;; 첨부 자료