2008-03-07
org.kosen.entty.User@178967a0
차영록(youngcha)
- 2
배양여액내 아노노산 조성 분석하기 위해
AccQ Tag 법을 이용하여 HPLC로 분석코자합니다.
샘플내 단백질을 산가수분해하여야 하는데,
6N HCL를 샘플량의 50배 정도 넣고 120도에서 1시간 정도 가열한 다음
유도체화하기 전에 HCL를 냉동건조기를 이용하여 건조하려고 합니다.
문제는 6N HCL 강산을 건조시켜야 하므로
장치에 문제가 생길것 같아서
먼저 6N NaOH로 위와 동일한 량을 넣고 중화시켜서
건조기에 넣으려고 하는데(냉동건조기 보호를 위해)
이 과정에서 가수분해한 아미노산이 분해되거나 변형되지는 않는지
궁금합니다.
Evaporator를 사용하는 경우도 있는데,
샘플량이 적어서 회수율이 떨어지고, 시간이 많이 걸리는 단점때문에
가능하면 진공건조기를 이용하려고 합니다.
회신 부탁드립니다.
- 산가수분해
- 아미노산
- HPLC
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
이상후님의 답변
2008-03-07- 0
>배양여액내 아노노산 조성 분석하기 위해 >AccQ Tag 법을 이용하여 HPLC로 분석코자합니다. > >샘플내 단백질을 산가수분해하여야 하는데, >6N HCL를 샘플량의 50배 정도 넣고 120도에서 1시간 정도 가열한 다음 >유도체화하기 전에 HCL를 냉동건조기를 이용하여 건조하려고 합니다. > >문제는 6N HCL 강산을 건조시켜야 하므로 >장치에 문제가 생길것 같아서 >먼저 6N NaOH로 위와 동일한 량을 넣고 중화시켜서 >건조기에 넣으려고 하는데(냉동건조기 보호를 위해) > >이 과정에서 가수분해한 아미노산이 분해되거나 변형되지는 않는지 >궁금합니다. > >Evaporator를 사용하는 경우도 있는데, >샘플량이 적어서 회수율이 떨어지고, 시간이 많이 걸리는 단점때문에 >가능하면 진공건조기를 이용하려고 합니다. > >회신 부탁드립니다. > 중화반응(강산-강염기)시에는 분해된 아미노산에 크게 영향을 주지 않을 것으로 판단되나 대부분 AccQ tag을 부착시키는 Kit으로 가수분해된 아미노산을 유도체화 하여 아미노산 분석을 수행할때, 산처리된 아미노산액을 메스플라스크에 옮긴후 초순수 물로 상응하는 부피만큼 첨가하여 희석후 여과후에 분석하는 것이 보편적인 방법입니다. -
답변
안길홍님의 답변
2010-01-27- 0
>배양여액내 아노노산 조성 분석하기 위해 >AccQ Tag 법을 이용하여 HPLC로 분석코자합니다.>>샘플내 단백질을 산가수분해하여야 하는데,>6N HCL를 샘플량의 50배 정도 넣고 120도에서 1시간 정도 가열한 다음>유도체화하기 전에 HCL를 냉동건조기를 이용하여 건조하려고 합니다.>>문제는 6N HCL 강산을 건조시켜야 하므로 >장치에 문제가 생길것 같아서>먼저 6N NaOH로 위와 동일한 량을 넣고 중화시켜서>건조기에 넣으려고 하는데(냉동건조기 보호를 위해)>>이 과정에서 가수분해한 아미노산이 분해되거나 변형되지는 않는지>궁금합니다.>>Evaporator를 사용하는 경우도 있는데,>샘플량이 적어서 회수율이 떨어지고, 시간이 많이 걸리는 단점때문에>가능하면 진공건조기를 이용하려고 합니다.>>회신 부탁드립니다. 첨부자료